Sez12ノックアウトマウスを用いた顎形態形成に関する研究

Sez12基因敲除小鼠颌骨形态发生研究

基本信息

批准号：
19659483
负责人：
梶原景正
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Tokai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

Sez12ノックアウトマウスに認められた顎形態異常の病理解剖学的解析Sez12ノックアウトマウスおよび野生型マウスの骨格標本から顎骨の個々の寸法などを計測したところ、Sez12ノックアウトマウス上顎形態の異常、特にfrontonasal長の短縮が認められた。これら顎形態異常の影響をCTスキャンから3次元画像を解析したところ、frontonasa1長の短縮による咬合異常・歯列不正・副鼻腔短縮による鼻中隔湾曲症が認められた。クラゲ緑色蛍光物質(GFP)ノックインを指標としたSez12の発生段階での発現解析Sez12遺伝子の開始コドン上流にノックインされたGFP遺伝子は、Sez12内在性プロモータによる制御を受ける。著明なGFP蛍光レベルの上昇は、胎生10日目では神経堤・第一鰓弓・頭部間葉組織に認められた。出産直後のマウスでは、上顎・副鼻腔領域でGFP蛍光レベルが著しく高かった。従って、上顎領域の形態異常はSez12欠失により引き起こされ、また神経堤由来の神経冠細胞にSez12が欠失していることも上顎領域の形態異常の原因のひとつと考えられた。Sez12とVelo-cardio-facial/DiGeore症候群との関連性についての検討ヘテロ型Sez12ノックアウトマウスでも顎顔面異常が認められた。野生型およびヘテロ型・ホモ型のSez12ノックアウトマウスについて、頭部骨格標本からfrontonasal長の寸法を計測したところ、ヘテロ型Sez12ノックアウトマウスでも野生型と比較して有意にfrontonasal長の短縮が認められた。Hemizygousな22番染色体欠失に起因する本症候群のモデルマウスとして確立できることが伺える。

Sez12 基因敲除小鼠颌骨形态异常的病理解剖分析当测量 Sez12 基因敲除小鼠和野生型小鼠的骨骼标本的颌骨个体尺寸时，我们发现 Sez12 基因敲除小鼠上颌骨形态异常，尤其是额鼻骨长度缩短被批准。当我们使用 CT 扫描的 3D 图像分析这些颌形态异常的影响时，我们发现由于额鼻 1 长度缩短而导致鼻窦缩短，导致咬合异常、牙列排列不齐和鼻中隔偏差。以水母绿色荧光物质（GFP）敲入为指标进行发育阶段Sez12的表达分析 Sez12基因起始密码子上游敲入的GFP基因受Sez12内源启动子调控。在胚胎第 10 天，在神经嵴、第一鳃弓和头部间充质组织中观察到 GFP 荧光水平显着增加。在小鼠刚出生后，上颌窦和鼻窦区域的 GFP 荧光水平显着升高。因此，上颌区形态异常是由Sez12缺失引起的，神经嵴来源的神经嵴细胞中Sez12的缺失被认为是上颌区形态异常的原因之一。检查 Sez12 与 Velo-cardio-facial/DiGeore 综合征之间的关系在杂合子 Sez12 敲除小鼠中也观察到颌面异常。当我们测量野生型、杂合/同源 Sez12 敲除小鼠的头部骨骼标本的额鼻长度时，我们发现与野生型相比，杂合子 Sez12 敲除小鼠的额鼻长度显着缩短。这表明它可以被建立为这种由22号染色体半合子缺失引起的综合征的模型小鼠。