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組織障害の新指標 : 膜インターフェースにおける骨格蛋白質のヒドロキシノネナール修飾
组织损伤的新指标：膜界面支架蛋白的羟基壬醛修饰
基本信息
- 批准号：19658116
- 负责人：
- 金额：$ 2.24万
- 依托单位：
- 依托单位国家：日本
- 项目类别：Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份：2007
- 资助国家：日本
- 起止时间：2007 至 2008
- 项目状态：已结题
- 来源：
- 关键词：
项目摘要
A. 酸化剤により人為的に過酸化傷害を生じさせた赤血球、対照新鮮赤血球からATP存在下、非存在下で膜ゴーストを作製し、それぞれのスペクトリンについて、HNE付加量と付加部位を抗HNE抗体でのイムノブロットとプロテアーゼ分解フラグメントのMALDI-TOF MS解析で比較解析した。その結果、ATP存在下、即ち生理的条件下の赤血球膜では、同じ酸化負荷をかけてもATP非存在下に比べHNE修飾の程度が有意に低いことが明らかになった。修飾部位は、α-、β-スペクトリンともに、膜脂質との相互作用が示唆されている領域に集中しており、酸化剤存在下では、ATP非存在下で親水性領域に検出される傾向が特にα-スペクトリンで認められた。HNE修飾スペクトリンと膜反転小胞との結合は現在検討中である。B. 脳、筋のホモジェネートのイムノブロットでスペクトリン類似蛋白質のHNE修飾を検出することを試みた。200kDaより大きな分子サイズの領域に弱いシグナルを認めたが、分子の同定には至っていない。現在、MALDI-TOF MSによる解析を継続中である。
A.膜幽灵是由人为地引起过氧化损伤的红细胞制备的，在存在和不存在ATP的情况下，对新鲜的红细胞进行了对照新鲜的红细胞，对于每种光谱，通过使用抗HNE抗体和MALDI-TOF MS分析蛋白酶降解片段来比较HNE添加和添加部位的量和添加位点。结果表明，在存在ATP的情况下，即在生理条件下的红细胞膜中，即使使用相同的氧化负荷，HNE修饰程度也明显低于没有ATP的情况。修饰位点集中在已经提出与膜脂质相互作用的区域中，在存在氧化剂的情况下，在没有ATP的情况下在没有ATP的情况下在α-谱蛋白中特别观察到了一种在亲水区域中检测到的趋势。目前正在研究HNE修饰光谱与膜倒囊泡与膜倒囊泡的结合。 B.我们试图检测脑和肌肉匀浆的免疫印迹中光谱样蛋白的HNE修饰。我们在分子大小大于200 kDa的区域发现信号较弱，但尚未达到分子鉴定。当前，使用MALDI-TOF MS的分析正在继续。
项目成果
期刊论文数量（8）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
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- DOI：
- 发表时间：2007
- 期刊：
- 影响因子：0
- 作者：新敷信人;他3名
- 通讯作者：他3名
A novel posttranslational modification with 4‐hydroxynonenal of spectrin, the major red cell membrane skeletal protein
血影蛋白（主要红细胞膜骨骼蛋白）的 4-羟基壬烯醛的新型翻译后修饰
- DOI：
- 发表时间：2007
- 期刊：
- 影响因子：0
- 作者：Arashiki;N.、他5名
- 通讯作者：N.、他5名
A novel posttranslational modification with 4-hydroxynonenal of spectrin, the major red cell membrane skeletal protein
血影蛋白（主要红细胞膜骨骼蛋白）的 4-羟基壬烯醛的新型翻译后修饰
- DOI：
- 发表时间：2008
- 期刊：
- 影响因子：0
- 作者：Arashiki;N.、他5名
- 通讯作者：N.、他5名
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