小脳プルキンエ細胞特異的薬剤誘導性ポリグルタミン産生マウスの作出と解析

小脑浦肯野细胞特异性药物诱导的多聚谷氨酰胺产生小鼠的产生和分析

• 批准号: 17650106
• 负责人: 平井 宏和
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Gunma University (2006)Kanazawa University (2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17650106/
• 关键词: 脊髄小脳変性症; プルキンエ細胞; ポリグルタミン病; 小脳; 神経変性疾患; 運動失調; CAGリピート

テトラサイクリンの中止により時期特異的に、小脳プルキンエ細胞に限局し、異常伸長したCAGリピートをもつ脊髄小脳変性症(SCA)遺伝子を発現するモデルマウスの作出を目的とした。この部位時期特異的遺伝子発現マウスの作出には以下の2種類のトランスジェニック(Tg)マウスを作出し、それらをかけ合わせる必要がある。1)L7-rtTAプルキンエ細胞特異的プロモーターL7制御下で、リバーステトラサイクリントランスアクチベーター(rtTA)遺伝子を発現するTgマウス。2)tet0-Ataxin-1[Q76]-IRES-GFP(1)に関しては、すぐれた2ラインのTgマウスを得ている。これらマウスの小脳皮質にtetoプロモーター制御下でGFPを発現するレンチウイルスベクターを接種し、DOXを2週間与えたところ、プルキンエ細胞特異的なGFPの発現が観察された。(2)に関しては、コンストラクトを作出、外注にて受精卵にインジェクションし産仔を得たが、1ラインも目的のものが得られなかった。そこで再びコンストラクトを作出しなおして現在外注に出しているところである。これ以外にL7プロモーター制御下でSCA type1遺伝子を発現するTgマウスを作出した。

本研究的目的是创建一种模型小鼠，其中脊髓小脑共济失调 (SCA) 基因（定位于小脑浦肯野细胞并具有异常扩增的 CAG 重复序列）通过停止四环素以时间特异性方式表达。为了创建表达该区域特异性基因的小鼠，需要创建以下两种类型的转基因（Tg）小鼠并将它们杂交。 1) L7-rtTA Tg 小鼠，在浦肯野细胞特异性启动子 L7 的控制下表达反向四环素反式激活子 (rtTA) 基因。 2)关于tet0-Ataxin-1[Q76]-IRES-GFP(1)，我们获得了两个优良的Tg小鼠品系。当这些小鼠的小脑皮层接种在 teto 启动子控制下表达 GFP 的慢病毒载体并给予 DOX 2 周时，观察到浦肯野细胞特异性 GFP 表达。关于（2），我们创建了一个构建体并将其注射到外包的受精卵中以获得幼崽，但没有获得任何所需产品的品系。因此，我们重新创建了该结构，目前正在将其外包。此外，我们还培育了在 L7 启动子控制下表达 SCA 1 型基因的 Tg 小鼠。

项目成果

In vivo transduction of murine cerebellar Purkinje cells by HIV-derived lentiviral vectors

• DOI: 10.1016/j.brainres.2006.01.104
• 发表时间: 2006-04
• 期刊: Brain Research
• 影响因子: 2.9
• 作者: T. Torashima;S. Okoyama;T. Nishizaki;H. Hirai

Exposure of lentiviral vectors to subneutral pH shifts the tropism from Purkinje cell to Bergmann glia

• DOI: 10.1111/j.1460-9568.2006.04927.x
• 发表时间: 2006-07-01
• 期刊: EUROPEAN JOURNAL OF NEUROSCIENCE
• 影响因子: 3.4
• 作者: Torashima, Takashi;Yamada, Nobuaki;Hirai, Hirokazu
• 通讯作者: Hirai, Hirokazu