プラダー・ウィリー症候群の摂食亢進におけるグレリンの役割

生长素释放肽在普瑞德-威利综合征吞咽过多中的作用

基本信息

批准号：
16659283
负责人：
児島将康
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

本年はグレリンの遺伝子発現調節機構について研究を行った。グレリンの発現・分泌調節はグレリンの生理作用を調節する上で非常に重要であるが、グレリンの発現・分泌を調節する因子としては、現在のところ空腹シグナルしか知られていない。そこでグレリンの遺伝子発現調節に関与する因子を探索するために、ヒトグレリン・プロモーターシークエンスをルシフェラーゼ発現ベクターに組み込んだレポーターベクターを作成し、グレリン遺伝子発現を調節する転写因子の研究に取り組んだ。グレリン・プロモーター配列において、これまでに明らかでなかったグレリン遺伝子発現の抑制領域を見出した。グレリン・プロモーターの-1600領域付近まで削ったベクターでは、プロモーター活性が低下した。またコンピューターサーチによってグレリン遺伝子のプロモーター領域に結合する転写因子の候補を探索し、その中で入手できたものについて、プロモーター活性に及ぼす影響を調べた。その結果、グレリン遺伝子のプロモーター活性を調節する転写因子として、抑制性のNF-kBと促進性のNkx2.2が関与していることを見出した。グレリン遺伝子のプロモーター領域に抑制性の領域を見出した。この結果グレリン遺伝子は正負のバランスによって発現調節が行われていると考えられた。またリポポリサッカライド(LPS)投与によって敗血症性ショックに陥るが、このとき血中グレリン濃度の減少が見られる。LPS投与によってToll-like4受容体が活性化され、引き続いてNF-kBが活性化される。NF-kBによってグレリン遺伝子のプロモーター活性が抑制されることから、LPS投与による血中グレリン濃度の減少にはNF-kBが関与している可能性が強いと考えられた。

今年，我们进行了ghrelin基因表达调控机制的研究。 ghrelin表达和分泌的调节对于调节ghrelin的生理作用非常重要，但目前已知只有饥饿信号作为调节ghrelin表达和分泌的因素。因此，为了寻找调控ghrelin基因表达的因子，我们将人ghrelin启动子序列整合到荧光素酶表达载体中，构建了报告载体，并开始研究调控ghrelin基因表达的转录因子。在ghrelin启动子序列中，我们发现了一个以前未知的区域，该区域抑制ghrelin基因表达。在生长素释放肽启动子被删除至-1600区域附近的载体中，启动子活性降低。我们还通过计算机搜索寻找与ghrelin基因启动子区域结合的候选转录因子，并研究了可用转录因子对启动子活性的影响。结果，我们发现抑制性 NF-kB 和刺激性 Nkx2.2 作为转录因子参与调节 ghrelin 基因的启动子活性。我们在 ghrelin 基因的启动子区域发现了一个抑制区域。结果，生长素释放肽基因的表达被认为受到正/负平衡的调节。此外，给予脂多糖（LPS）会引起感染性休克，此时血液中生长素释放肽浓度会降低。 LPS 激活 Toll 样 4 受体，随后激活 NF-kB。由于NF-kB抑制ghrelin基因的启动子活性，因此认为NF-kB很可能与LPS给药引起的血中ghrelin浓度降低有关。