肝疾患におけるビタミンD代謝の酵素化学的研究

肝脏疾病中维生素 D 代谢的酶化学研究

• 批准号: 12770687
• 负责人: 江藤 忠明
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: 宮崎医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770687/
• 关键词: ビタミンD; 水酸化酵素; ミトコンドリア; 肝性骨異栄養症; アドレノドキシン; NADPH-アドレノドキシン還元酵素; Hepatic Osreodystrophy

肝障害のビタミンDの25-水酸化に及ぼす影響を調べるために,肝疾患モデルとして四塩化炭素による肝障害ラットを作成し血漿中のCalcidiol(25-OH-D_3,25-水酸化ビタミンD_3)濃度をShimizuらの「22-hydroxytetranorvitaminD_3」を内部標準としHPLC-UVで測定する定量法を用いて比較した.その結果肝疾患モデルとコントロール群との間に血漿中25-OH-D_3について有意な差を得られなかった.そこで,胆管結紮による閉塞性黄疸モデルのラットを用いて同様の実験を行ったが,やはり有意な差を得ることは出来なかった.これらの結果から,通常のラットでは予想以上にビタミンDの体内プールが多く,短期間に生じた肝障害では血漿中25-OH-D_3値が影響を受けにくいことが予想された.そこで25-水酸化活性は影響を受けている可能性は否定できないため,我々が確立した1α-hydroxyvitaminD_3を基質として用いた25-水酸化反応の測定系を用いて,肝障害モデルとコントロール群でその活性を比較した.その結果比活性は平均0.4nmol/min/mg proteinと比較的高い活性が得られたが,やはり両群間で有意差は得られなかった.以上の結果から,肝性骨異栄養症を25-水酸化活性の障害の観点から説明することは困難と考えられる.

为了研究维生素D对肝损伤对25-羟基化的影响，我们创建了由四氯化碳引起的肝损伤大鼠作为肝病模型，并比较了钙二酚（25-OH-D_3,2,25--D_3,25-羟基维生素D_3）在使用HPLC-uv中使用“ 22-HYDROXY”中的hplc-uv， Shimizu等人，使用HPLC-UV。结果，我们没有在肝病模型和对照组之间获得显着差异。因此，使用了由胆管连接引起的阻塞性黄疸模型的大鼠。尽管我们进行了类似的实验，但我们无法获得显着差异。这些结果表明，在正常大鼠中，维生素D的体内池比预期的要大，而血浆25-OH-D_3值不会在短时间内发生的肝损伤中受到影响。因此，我们不能否认使用25-羟基活性受到影响，因此我们使用25-羟基乙基反应测量系统使用1α-羟基维氏素_3作为底物比较了肝损伤模型与对照组之间的活性。结果，比例活性平均0.4 nmol/min/mg。尽管蛋白质和蛋白质的活性相对较高，但两组之间未获得显着差异。从以上结果来看，从25-羟基活性的障碍的角度来看，很难解释肝骨营养不良。

项目成果

Taniguchi T,Eto TA, et al.: "Newly established assay method for 25-hydroxyvitamin D_3 24-hydroxylase revealed much lower K_m for 25-hydroxyvitamin D_3 than for 1α,25-dihydroxyvitamin D_3"J Bone Miner Res. 16・1. 57-62 (2001)

Taniguchi T、Eto TA 等人：“新建立的 25-羟基维生素 D_3 24-羟化酶测定方法显示 25-羟基维生素 D_3 的 K_m 比 1α,25-二羟基维生素 D_3 低得多”J Bone Miner Res. 16・1。 57-62（2001）