下垂体に発現する脊髄小脳性運動失調症原因遺伝子の分子細胞学的機能の解明

阐明垂体中表达的脊髓小脑共济失调引起基因的分子和细胞学功能

基本信息

批准号：
12770628
负责人：
小川智史
金额：
$ 1.41万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は、下垂体前葉ゴナドトロフ系列の細胞を用いて細胞特異的に発現する遺伝子をサブトラクションクローニング法を用いて解析した。その結果、2量体で構成されている黄体化ホルモン(LH)のα鎖とLHβ鎖の両方を合成している細胞株に多く発現している遺伝子群の中に脊髄小脳性運動失調症原因遺伝子と同一の配列をコードするcDNAが存在していることが判明した。本遺伝子は、近年トリプレットリピート病と呼ばれる3塩基リピートの遺伝子挿入による疾患遺伝子群の代表として注目を浴びているが、下垂体で発現している事に関しては本研究が初めての報告となった。この遺伝子の発現は、下垂体前葉ホルモン産生細胞株では検出されず、同じゴナドトロフ系列の細胞株、例えばα鎖のみを合成する細胞などでも観察されない。この結果を発生段階に照らし合わせると未熟なα鎖のみを合成するゴナドトロフからα鎖/LHβ鎖の両方を産生するゴナドトロフに分化する過程で本遺伝子が発現していると思われる。更に、性腺切除によって下垂体ゴナドトロフを機能亢進状態にすると下垂体における本遺伝子の発現が増加する事も判明し、本遺伝子がゴナドトロピンの産生に関係していると考えられた。そこで、更に様々な形態学的な、顕微鏡下の観察に展開し、でラット下垂体における本遺伝子の細胞分布について観察したところ、本遺伝子産物は下垂体においてはゴナドトロフに局在し、去勢によって増加するLHの発現と共に、発現量が増加することが分かった。しかしながら、LHの直接誘導の証拠には至っていない。また、下垂体においてはホルモンを産生しない濾胞星状細胞株にも僅かな発現が認められたり、各臓器に発現を調べると、多くの臓器に少なからず発現していることが示され、現在では、組織の特異性というよりはむしろ、細胞の機能維持、生存維持において重要な役割を担っていると考えている。

我们使用减法克隆分析了使用垂体前促性腺营养谱系中的细胞特异性表达的基因。结果，发现与脊髓脑性共济失调基因相同序列的cDNA存在于在细胞系中高度表达的基因中，该基因在细胞系中高表达，该基因合成了二聚体柠檬酸激素（LH）的α-和LHβ链。近年来，该基因引起了人们的关注，这是由插入三碱基重复序列（称为三重疾病重复疾病）引起的一组疾病基因，但这项研究是关于垂体中如何表达的第一个报告。该基因的表达未在产生前垂体激素的细胞系中检测到，并且在相同的促性腺营养谱系的细胞系中未观察到，例如仅合成α链的细胞。当将该结果与发育阶段进行比较时，似乎该基因在与促性腺营养区分化的过程中表达，这些促性腺营养仅将未成熟的α链合成为产生α链/LHβ链的促性腺营养。此外，还发现垂体促性腺营养性的过度功能状态在垂体中的基因表达增加，并且认为该基因参与促性腺激素的产生。因此，我们进一步扩展到显微镜下的各种形态学观察结果，并观察到该基因在大鼠垂体中的细胞分布，并发现该基因产物局部与垂体中的促性腺营养素局部，并且其表达水平随LH的表达增加而增加，这会通过castration castration castatrations增加。但是，未直接诱导LH的证据。此外，在垂体中不产生激素的卵泡星形胶质细胞系中还观察到了小表达，并且在每个器官中检查表达时，已经证明它们在大量器官中表达，目前，它在维持细胞功能和维持生存方面而不是组织特定性方面起着重要的作用。