サイトカイニン応答性遺伝子群の機能解析と生合成調節物質の評価系への適用

细胞分裂素反应基因的功能分析及其在生物合成调控因子评价体系中的应用

基本信息

批准号：
12760072
负责人：
中野雄司
金额：
$ 1.6万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

1.サイトカイニン応答性遺伝子の探索サイトカイニン早期応答性を示すcig遺伝子群数種がに発現誘導される新規遺伝子群cigをディファレンシャル・ディスプレイ法によって同定した。その完全長cDNAの単離、機能解析を行った所、プロリン脱水素酵素と高い相同性をしめすcig1、GDP/GTP交換因子ファミリーに相同性を示すcig2が単離された。プロリンはタンパク質の構成成分である基本アミノ酸のひとつであるが、プロリンの合成、分解に関わる酵素が植物ホルモンによって発現調節されている報告例はない。またこのcig1は、オーキシン共存下では明瞭なサイトカイニン応答性が認められるが、オーキシン非共存下ではアブシジン酸によっても発現応答を受ける事が確認された。cig2は、タンパク質合成の開始時にmRNA/リボゾームと結合するGTP結合タンパク質eIF2に対する調節因子eIF2Bファミリー、ras、rab、rhoと分類される発癌原因性GTP結合タンパク質に対する調節因子であるGDSファミリーと相同性が認められた。組織別発現量は花芽のつぼみで最も高く、GFPを用いた解析により核移行性が確認された。また、アラビドプシスに認められたcig2相同性遺伝子の破壊株は、予備的知見ながら著しい早期花成が認められた。破壊株と共に作成中の形質転換体を用いて、cig2の植物体における機能解析を続ける予定である。2.サイトカイニン応答性遺伝子cigの発現変動を指標としたサイトカイニン生合成阻害剤の探索サイトカイニン刺激に対する早期応答性が確認されたcig2は、Arabidopsisゲノム上に高い相同性遺伝子が確認された。この遺伝子のプロモーター領域約1kbpと発色遺伝子GUSを融合させたベクターを作成し、植物体に現在導入中である。このT2世代発芽種子を用いてサイトカイニン生合成阻害剤迅速検定系の適用を試みる予定である。

1。chinin响应基因搜索现场同。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。已分离出与prinolin脱氢酶具有很高同源性的同源家族的完整长度cDNA，CIG2的全面和功能分析，并且已分离出GDP/GTP交换因子家族。脯氨酸是蛋白质的碱性氨基酸之一，但没有报道称与脯氨酸的合成和分解相关的酶是由植物激素提出的。此外，该CIG1在轴蛋白共存下具有明显的位点CHININ反应，但已证实在非涂料下，脱氧蛋白将通过脱甲酸表达。 CIG2是GDS家族，它是一个调节因子EIF2B家族，RAS，RAB和RHO，它是GTP结合蛋白EIF2的调节因子，在识别蛋白质合成开始时，它与mRNA/Revosome键合。表达的量 - 逐学的量是花芽的芽中最高的，并且通过使用GFP进行分析证实了核转移。此外，拟南芥认可的CIG2同源基因的破坏性份额因其出色的早期开花而被认可。我们计划使用具有破坏性菌株创建的变压器在CIG2植物中继续进行功能分析。 2。甲氨酸反应基因CIGININ在寻找CIG2时寻找Cyinine Biosynthetic抑制剂，CIG2已被证实在拟南芥基因组上具有高同源基因。现在在植物中引入了该基因启动子面积和彩色基因GUS的矢量。我们计划使用此T2代发芽种子应用Site Chinin Live Consansis抑制剂快速测试系统。