昆虫病原ウイルスによる宿主昆虫の内分泌制御機構の解明

阐明昆虫病原病毒对宿主昆虫的内分泌控制机制

• 批准号: 11760034
• 负责人: 仲井 まどか
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11760034/
• 关键词: 昆虫ウイルス; 内分泌制御; ウイルス包埋体; 昆虫ポックスウイルス; 20OH-エクダイソン; 前胸腺; アワヨトウ; 前胸腺刺激ホルモン; 顆粒病ウイルス; 幼弱ホルモンエステラーゼ; チャノコカクモンハマキ; UDP-グリコシルトランスフェラーゼ

1)ウイルス感染虫の発育に関する調査4齢アワヨトウ幼虫に、昆虫ポックスウイルス(EPV)を接種し、感染虫1頭あたりに生産するウイルス包埋体数を調査した。包埋体数の測定方法は、EPVに対して感受性の高いシロイチモジヨトウ幼虫を用いた生物検定と血球計算盤における計測を用いた。4齢アワヨトウ幼虫に95%致死濃度の2倍量のEPVを接種すると、感染虫は、すべて幼虫期で致死した。また、ウイルス接種後は、速やかに増殖を開始し、最終的な幼虫一個体あたりの包埋体の生産量は約3×10^9OBs/mlであった。また、6齢に95%致死濃度の2倍濃度を接種した場合は、すべて蛹化後致死した。ウイルス包埋体の増殖は、接種後ゆるやかに立ち上がり、最終的な一蛹あたりの包埋体の生産量は、4齢接種の場合に比べて有意に低かった。さらに、5齢アワヨトウ幼虫に、EPVを95%致死濃度の2倍濃度接種したところEPV感染により幼虫期・蛹期・前蛹期で致死する三タイプが出現した。それぞれの死体あたりの包埋体の生産量を調査したところ、それぞれに有意差が認められ、宿主の変態が最終的なウイルス包埋体の生産量に影響を及ぼすことが示唆された。2)In vitroにおけるウイルス感染虫の前胸腺の活性調査健全およびEPV感染ハスモンヨトウ幼虫より脳を摘出し、前胸腺刺激ホルモン(PTTH)の粗精製物を調整した。次にEPV感染虫の前胸腺を摘出し、培養液中で前述のPTTH粗精製物と共に培養して、in vitroにおける前胸腺からの20OH-エクダイソンの放出をラジオイミノアッセイで検出した。その結果、EPV感染虫より摘出した前胸腺は健全虫のPTTHにより活性化しないことが示唆された。

1)病毒感染昆虫的发育调查将昆虫痘病毒(EPV)接种到四龄草地贪夜蛾幼虫中，调查每只感染昆虫产生的病毒包埋体的数量。使用对 EPV 高度敏感的粘虫幼虫进行生物测定，并使用血细胞计数器进行测量，从而测量包埋体的数量。当4龄草地贪夜蛾幼虫接种95%致死浓度两倍的EPV时，所有受感染昆虫均在幼虫阶段死亡。而且，接种病毒后，幼虫开始快速繁殖，最终每只幼虫的包埋体产量约为3×10^9 OBs/ml。另外，当6龄虫接种2倍95%致死浓度时，化蛹后全部死亡。接种后病毒包埋体增殖缓慢，每蛹最终包埋体产量明显低于4龄接种。此外，当五龄草地贪夜蛾幼虫接种浓度为95%致死浓度两倍的EPV时，出现了三种类型的EPV感染，分别在幼虫、蛹和预蛹阶段致命。当我们调查每具尸体产生的病毒嵌入量时，我们发现它们之间存在显着差异，这表明宿主变态影响了最终产生的病毒嵌入量。 2)病毒感染昆虫前胸腺活性的体外研究从健康和感染EPV的斜纹夜蛾幼虫中取出大脑，制备前胸腺刺激素(PTTH)粗品。接下来，取出感染EPV的昆虫的前胸腺，并用上述粗PTTH在培养基中培养，并通过放射亚胺测定法检测体外前胸腺释放的20OH-蜕皮激素。结果表明，从感染 EPV 的昆虫中取出的前胸腺不会被健康昆虫的 PTTH 激活。