乳歯歯根吸収に関する遺伝子の同定と吸収制御メカニズムの解明

乳牙牙根吸收相关基因的鉴定及吸收控制机制的阐明

• 批准号: 10771188
• 负责人: 長谷川 智一
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771188/
• 关键词: OPG; OCIF; OPGL; ODF; periodontal ligament; osteoclast genesis; 歯根吸収; osteoprotegerin; osteoprotegerin ligand; 歯根膜細胞; 歯髄細胞; 乳歯; 永久歯; 破骨細胞

乳歯歯根吸収に関与する遺伝子の同定と吸収制御メカニズムの解明のために、以下の研究を前年に引き続き行った。OPG/OCIFおよびOPGL/ODFが蛋白質として産生されているかどうかを検討するため、OPG/OCIFではWestern blot analysis、OPGL/ODFには免疫染色および免疫電顕を行った。OPG/OCIFの蛋白質産生量はNorthern blot analysisの結果に一致した。OPGL/ODFの産生は全ての細胞においてRT-PCRの結果に一致して、免疫染色陽性であった。蛋白質が実際に細胞膜表面に発現しているかどうかを、免疫電顕よって検討した。その結果OPGL/ODFの発現が、細胞膜表面に局在していることが明らかとなった。以上の結果から、乳歯および永久歯由来の、歯根膜細胞、歯髄細胞は、全てOPG/OCIF,OPGL/ODFのmRNA発現が可能であった。またそのmRNAの発現強度は、Vit.D,DEXによって調節されていた。またOPG/OCIFの蛋白質産生量もVit.D,DEXによって調節されていた。OPGL/ODFの蛋白産生が可能なことも、免疫染色、免疫電顕であきらかとなった。さらに産生したOPGL/ODFはin vitroで破骨細胞の誘導が可能であることが明らかとなったが、乳歯と永久歯で破骨細胞の誘導数に有意差は認められなかった。さらにin vitroで再現性高く破骨細胞を誘導するためには抗OPG抗体の投与が必要であったことから、今回解析を行った全ての細胞は破骨細胞の誘導能は有するが、生理的条件下では破骨細胞の誘導を抑制していることが考えられた。以上の結果から乳歯の歯根吸収には、他の調節機構が存在することが示唆された。

继去年的基础上，我们进行了以下研究，以鉴定参与乳牙牙根吸收的基因并阐明吸收控制机制。为了检查OPG/OCIF和OPGL/ODF是否作为蛋白质产生，对OPG/OCIF进行蛋白质印迹分析，并对OPGL/ODF进行免疫染色和免疫电子显微镜检查。 OPG/OCIF的蛋白产量与Northern blot分析结果一致。所有细胞的免疫染色显示 OPGL/ODF 的产生呈阳性，与 RT-PCR 结果一致。我们使用免疫电子显微镜检查了该蛋白质是否实际上在细胞膜表面表达。结果表明OPGL/ODF表达定位于细胞膜表面。由以上结果可知，乳牙和恒牙来源的牙周膜细胞和牙髓细胞均能够表达OPG/OCIF和OPGL/ODF mRNA。此外，mRNA的表达强度受Vit.D和DEX的调节。此外，OPG/OCIF蛋白的产生量也受到Vit.D和DEX的调节。免疫染色和免疫电子显微镜显示OPGL/ODF蛋白的产生是可能的。此外，还表明所产生的OPGL/ODF能够在体外诱导破骨细胞，但在乳牙和恒牙之间诱导的破骨细胞数量没有观察到显着差异。此外，由于需要施用抗OPG抗体以在体外以高再现性诱导破骨细胞，因此本次分析的所有细胞都具有诱导破骨细胞的能力，但在生理条件下，认为破骨细胞诱导受到抑制。这些结果表明乳牙牙根吸收存在其他调节机制。