ヒト卵巣における性ステロイド産生細胞の分化

人卵巢中性类固醇生成细胞的分化

基本信息

批准号：
09771287
负责人：
大場隆
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771287/
关键词：
卵巣表層上皮顆粒膜細胞 SCP2 StAR ステロイドホルモン SV-40ラージT抗源

项目摘要

これまでに我々は、ヒト卵巣表層上皮細胞には、sterol carrier protein 2(SCP2)、steroidogenic acute regulatory protein(StAR)、エストロゲンレセプターの遺伝子が発現しており、ステロイド産生細胞としての潜在的な能力を有していることを明らかにしていた。今回は、卵巣表層上皮細胞が顆粒膜細胞に分化するとの仮説を検証するため、エストロゲン合成に必須の酵素であるアロマターゼに着目し、ヒト卵巣表層上皮細胞におけるアロマターゼ発現の調節について検討した。ヒト卵巣表層上皮細胞を無血清培地で18時間インキュベートした後に、8-Br-cAMP(1mM)、ホルボールエステル(100pg/ml)、あるいはエストラジオール(10ng/ml)存在下で24時間培養した。回収した細胞からRNAを抽出して、ヒト卵巣のアロマターゼ遺伝子に特異的なプライマーを用いてRT-PCRを行った。刺激に対するコントロールとしては0.01%のDMSOを添加した。またRT-PCRの条件は内因性のヒトp-グロビン遺伝子の発現で比較した。ヒト卵巣表層上皮細胞にはアロマターゼのmRNAは発現していなかった。8-Br-cAMP、ホルボールエステルやエストラジオールによる刺激を行っても、アロマターゼの発現は認められなかった。さらに、SCP2、エストロゲンレセプターについて同様に検討すると、いずれも刺激による発現の変化はみられなかった。一方、ヒト卵巣の間質由来の培養細胞では、ステロイドホルモンは産生していなかったがアロマターゼおよびSCP2の発現が認められた。以上の結果より、卵巣表層上皮細胞が顆粒膜細胞に分化し、ステロイドホルモン産生能を獲得するという仮説を支持する証拠は得られず、SCP2やエストロゲンレセプターは他の細胞機能に関与していることが示唆された。

迄今为止，我们已经证明人卵巢表面上皮细胞表达甾醇载体蛋白2（SCP2）、类固醇生成急性调节蛋白（StAR）和雌激素受体基因，并且具有作为类固醇生成细胞的潜力。他有。为了验证卵巢表面上皮细胞分化为颗粒细胞的假设，我们以雌激素合成必需的酶芳香酶为研究对象，研究了芳香酶在人卵巢表面上皮细胞中表达的调控。将人卵巢表面上皮细胞在无血清培养基中孵育 18 小时，然后在 8-Br-cAMP (1 mM)、佛波酯 (100 pg/ml) 或雌二醇 (10 ng/ml) 存在下培养24小时。从收集的细胞中提取RNA，并使用人卵巢芳香酶基因特异的引物进行RT-PCR。添加 0.01% DMSO 作为刺激对照。此外，基于内源性人p-珠蛋白基因的表达比较了RT-PCR条件。芳香酶 mRNA 在人卵巢表面上皮细胞中不表达。即使用8-Br-cAMP、佛波酯或雌二醇刺激后也没有观察到芳香酶的表达。此外，当以相同的方式检查SCP2和雌激素受体时，没有观察到由于刺激而导致的表达变化。另一方面，源自人卵巢基质的培养细胞不产生类固醇激素，但表达芳香酶和SCP2。上述结果没有提供证据支持卵巢表面上皮细胞分化为颗粒细胞并获得类固醇激素产生能力的假设，并且表明SCP2和雌激素受体参与其他细胞功能。