脳下垂体腺腫の分泌小胞形成における基礎的研究-細胞内輸送を規定する諸因子の免疫組織化学的検討-

垂体腺瘤分泌囊泡形成的基础研究-细胞内转运调节因子的免疫组织化学检查-

基本信息

批准号：
09771065
负责人：
草〓博昭
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

ぺプチドホルモンや、血漿蛋白質などの蛋白質は、リボゾームで合成されて小胞体に移動し、ゴルジ装置を経て分泌顆粒となりその成熟を経て最終的には細胞形質膜に運搬され融合により細胞外に分泌される。この調節性分泌(regulatory pathway)では内分泌細胞が生成するホルモンの大半はこの過程を経るなかで翻訳及び各種翻訳後修飾を受け生理的活性を得る。これは細胞内小胞輸送の一つでもあるのだが、一つの膜系から他の膜系に移動し、結合し、融合する、という過程として理解されている。今回は内分泌細胞とその腫瘍における開口分泌機構に焦点をあわせ、下垂体及び下垂体腺腫における産生ホルモンとシナプトタグミン/シンタキシンの機能的相関とその腫瘍化に伴う病態、開口分泌の調節機構の一部明らかにすることを目的とすべく本研究を行った。ヒト正常下垂体剖検症例及び下垂体腺腫組織を対象に、in situ hybridization,免疫組織化学,免疫電顕法を用いて核内レセプター遺伝子発現を検討した。シナプトタグミン/シンタキシンを識別する抗体及びプローブを作成し、免疫組織化学的手法を用いて下垂体組織における蛋白/mRNAの局在を証明した。更に蛋白レベルでは高感度免疫組織化学Catalyzed signal amplification法によりシナプトタグミン/シンタキシン蛋白を検出すると、シナプトタグミン/シンタキシンは全種類の下垂体腺腫に発現していた。今年度の結果を踏まえ、開口分泌の調節機構にシナプトタグミン/シンタキシンの相互作用が示唆された。

肽类激素、血浆蛋白等蛋白质在核糖体中合成，转移至内质网，穿过高尔基体，成为分泌颗粒，成熟，最后转运至细胞质膜，通过融合分泌到细胞外完成。在这个调节途径中，内分泌细胞产生的激素大部分经过翻译和各种翻译后修饰以获得生理活性。这也是一种细胞内囊泡运输，被理解为囊泡从一个膜系统移动到另一个膜系统、结合和融合的过程。这次，我们将重点关注内分泌细胞及其肿瘤中的胞吐机制，阐明垂体和垂体腺瘤产生的激素与突触结合蛋白/突触结合蛋白之间的功能关系、与肿瘤发生相关的病理以及一些调控机制。进行胞吐作用的目的。使用原位杂交、免疫组织化学和免疫电子显微镜在正常人垂体尸检病例和垂体腺瘤组织中研究核受体基因表达。我们创建了识别突触结合蛋白/突触结合蛋白的抗体和探针，并使用免疫组织化学技术证明了蛋白质/mRNA 在垂体组织中的定位。此外，在蛋白质水平上，通过高灵敏免疫组化催化信号放大方法检测突触结合蛋白/突触结合蛋白，突触结合蛋白/突触结合蛋白在所有类型的垂体腺瘤中均有表达。根据今年的结果，突触结合蛋白/突触结合蛋白之间的相互作用被认为在胞吐作用的调节机制中存在。