日光性弾力線維症におけるメイラード反応後期生成物の免疫電顕による局在検討

使用免疫电子显微镜定位日光弹性组织中的晚期美拉德反应产物

• 批准号: 09770643
• 负责人: 萱島 研一
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770643/
• 关键词: Actinic elastosis; Maillard反応後期生成物; 免疫電顕; Photoaging; Maillard 反応後期生成物

先ず、Maillard反応後期生成物(以下、AGEsと略)の人生検材料における分布を、免疫電顕法を用いて検討した。一次抗体として、抗AGEs抗体(6D12).抗elastin抗体を用い、二次抗体としでは、15-nmもよび6-nm金コロイド標識抗マウスIgG抗体を用い、二重染色を行った。生検材料は、-4℃で固定、LR White resinに包埋した。高齢者露光部(顔面)における、elastotic degenerated fiberのamorphousおよびfibrous formでの比較では、前者においては、高電子密度(日光老化に伴って増加してくる)部分にはAGEsが、低電子密度の部分にはelastinが分布していた。後者では、両者が混在する形で分布していた。ただし、高電子密度の部分にAGEsが分布している点は共通であった。Grenzzoneでは、AGEs.elastinともに明らかな分布は認められなかったが、actinic elastosis領.域での線維芽細胞では、AGEsの散在的な分布を認めた。また、表皮レベルでもAGEsの軽度の分布を認めた。しかし、膠原線維においては、AGEsの分布はわずかしか認められなかった。動物モデルでの検討では、マウスに紫外線照射し、時間経過をおって先ず光顕レベルで観察した。しかしながら、UV-A、UV-B、UV-A+B照射群いずれにおいても明らかな日光弾性線維症を認めることができなかった。これまでは、AGEsの細胞での存在は確認されていなかったが、最近、細胞での存在の可能性も示唆されてきており、今回使用した抗体6D12以外の抗体を用いて、さらに検討する予定である。また、マウスでの日光弾性線維症モデルが確立できなかった原因は不明であるが、紫外線以外の要因が関与している可能性も考えられ、今後、紫外線と種々の因子を組み合わせて、さらに検討していく予定である。

首先，使用免疫电子显微镜检查了生命测试材料中晚期Maillard反应产物（以下简称为年龄）的分布。原代抗体用作抗AGS抗体（6D12）。抗肾上腺素抗体，二抗作为15 nm和6 nm胶体胶体标记的抗小鼠IgG IgG抗体。活检固定在-4°C下，并嵌入LR白色树脂中。在比较弹性变性纤维（面部）（面部）的弹性退化纤维的纤维形式和纤维形式中，在前者中，年龄分布在高电子密度（随着阳光衰老而增加），弹性蛋白分布在低电子密度中。在后者中，两者以混合方式分布。但是，很常见的是，年龄分布在具有高电子密度的区域。在格林佐尼，发现雌激素的分布清晰，但是在光弹性弹性区域的成纤维细胞中，年龄的分布分散。此外，在表皮水平上观察到了温和的年龄分布。但是，在胶原纤维中仅观察到年龄的少量分布。在动物模型中的研究中，用紫外线照射小鼠，并随着时间的推移在光显微剂水平上观察。但是，在UV-A，UV-B或UV-A+B辐射组中均未观察到明显的阳光弹性纤维化。到目前为止，尚未确认细胞中年龄的存在，但最近也有人建议它们可能存在于细胞中，并使用此时使用抗体6D12以外的抗体进行进一步研究。此外，尽管未能建立阳光弹性纤维化模型的原因是未知的，但可能涉及紫外线以外的其他因素，我们计划通过将紫外线与未来的各种因素相结合，以进一步进一步研究。

项目成果

Kumiko Mizutari et al.: "Photo-Enhanced Modification of Human Skin Elastin in Actinic Elastosis by N^ε-(Carboxymethyl)lysine.One of the Glvcoxidation of the Maillard Reaction" The Journal of Inverstigative Dermatology. 108. 797-802 (1997)

Kumiko Mizutari 等人：“N^ε-(羧甲基)赖氨酸对光化性弹性组织中人皮肤弹性蛋白的光增强修饰。美拉德反应的葡萄糖氧化之一”《皮肤病学研究杂志》108. 797-802 (1997)。 ）

萱島研一 他: "日光性弾性線維症におけるAGEの微細局在" 細胞. 30巻・13号. 26-30 (1998)

Kenichi Kayashima 等人：“日光弹性组织中 AGE 的精细定位”，Cell，第 30 卷，第 13 期，第 26-30 期（1998 年）。

Kumiko Mizutari et al.: "Photo-Enhanced Modification of Human Skin Elastin in Actinic Elastosis by N^ε-(Carboxmethyl) lysine, One of the Glycoxidation Products of the Maillard Reaction" The Journal of Investigative Dermatology. 108. 797-802 (1997)

Kumiko Mizutari 等人：“N^ε-（羧甲基）赖氨酸（美拉德反应的糖氧化产物之一）对光化性弹性组织中的人类皮肤弹性蛋白进行光增强修饰”《皮肤病学研究杂志》108. 797-802（ 1997）