破骨細胞の分化を調節する低分子化合物の探索およびその作用機構解析

寻找调节破骨细胞分化的低分子量化合物并分析其作用机制

基本信息

批准号：
09760076
负责人：
禹済泰
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

マウスの大胎骨から調製した骨髄を骨芽細胞とともに培養する共存培養法を用いて、カルシウムATPase阻害効果で細胞内カルシウムの上昇活性を有するcyclopiazonicacid(CPA)による破骨細胞の分化誘導機構を検討した。CPAによって誘導した破骨細胞は酵素活性や骨吸収などの破骨細胞に特有な特徴を有していることが示された。さらに、共存培養から分離された破骨細胞の前駆細胞とCPAで前処理した骨芽細胞との共存培養で破骨細胞の形成が認められたことから、CPAは骨芽細胞に作用し、破骨細胞の分化誘導活性を発現していることが明らかとなった。CPAとは異なる機構で細胞内カルシウムを上昇させるイオノマイシン(カルシウムイオノフォア)もCPAと同じように骨芽細胞の細胞内カルシウム上昇をもたらし、破骨細胞の分化を誘導した。細胞内力ルシウムキレーターであるBAPTA-AMや細胞内カルシウムプールからのカルシウム流出を阻害するdantroleneでCPAやイオノマイシンによる破骨細胞の分化誘導活性は阻害された。更に、共存培養系で細胞外カルシウム濃度の上昇は破骨細胞形成を誘導した。共存培養系で破骨細胞の分化を誘導するビタミンD_3やIL-1、PTHと同様に骨芽細胞上に破骨細胞分化誘導因子の発現を誘導することが明らかとなり、細胞内カルシウム上昇はビタミンD3やIL-1、PTHとは異なる新たな破骨細胞形成誘導シグナルであることが示唆された。

我们采用将小鼠大胎骨制备的骨髓与成骨细胞共培养的方法，研究了环吡嗪酸（CPA）诱导破骨细胞分化的机制，CPA具有通过抑制钙ATP酶增加细胞内钙的活性。做过。结果表明，CPA诱导的破骨细胞具有破骨细胞特有的特性，如酶活性和骨吸收。此外，在从共培养物中分离的破骨细胞前体细胞和用CPA预处理的成骨细胞的共培养物中观察到破骨细胞的形成，表明该蛋白质表达骨细胞分化诱导活性。离子霉素（一种钙离子载体）通过与 CPA 不同的机制增加细胞内钙，也与 CPA 类似，引起成骨细胞细胞内钙增加并诱导破骨细胞分化。 BAPTA-AM（一种细胞内萤光螯合剂）和丹曲林（抑制细胞内钙池中的钙流出）抑制了 CPA 和离子霉素诱导的破骨细胞分化诱导活性。此外，细胞外钙浓度的增加诱导共培养系统中破骨细胞的形成。研究表明，在共培养体系中，成骨细胞上诱导破骨细胞分化诱导因子的表达，类似于维生素D_3、IL-1和PTH诱导破骨细胞分化，而细胞内钙的增加是由维生素D_3、IL-1和PTH引起的。 D_3、IL-1和PTH被认为是与D3、IL-1和PTH不同的新的破骨细胞形成诱导信号。