脳傷害時におけるグリア細胞のニューロン機能増悪作用

脑损伤期间神经胶质细胞对神经元功能的加重作用

基本信息

批准号：
08772121
负责人：
北村佳久
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Kyoto Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ラット脳の海馬実質内にリポポリサッカライド(LPS)とインターフェロン-γ(IFN-γ)を同時に投与すると24時間後、注入部位周辺の多数のミクログリアがラミファイド型からアメボイド型に変化した。この時、MHCクラスIIも発現していた。また、このMHCクラスIIを発現したアメボイド型ミクログリアの一部にiNOS蛋白質の発現が認められ、大量のNO産生も認められた。一方、iNOSmRNAの発現(RT-PCR解析)はLPSとIFN-γの同時投与の6時間後に最大となった。一方、iNOS蛋白質は24時間後まで増加し続け、大量のNOを産生することが認められた。LPSあるいはIFN-γ単独投与では、注入部位周辺のミクログリアの一部はラミファイド型からアメボイド型に変化し、MHCクラスIIを発現したが、iNOS蛋白質の発現は認められなかった。また、滅菌生理食塩水の投与ではミクログリアは変化せず、ラミファイド型のままであった。このようにin vivo系は、in vitro系と比較するとiNOS誘導されにくい。つまり、LPSあるいはIFN-γ単独投与では誘導されず、複合刺激によりはじめて誘導される。また、LPSとIFN-γの同時投与の3日以降、iNOSおよびMHCクラスIIの発現は消失したが、アメボイド型ミクログリアに遅発生にMHCクラスIが発現した。さらに、一週間後には海馬ニューロン死が引き起こされた。以上の結果から、脳傷害時において活性化されたミクログリアで誘導されるiNOSから大量のNOが産生され、ニューロン機能が増悪される可能性が示唆された。

将脂多糖（LPS）和干扰素-γ（IFN-γ）同时注射到大鼠大脑海马实质中24小时后，注射部位周围的许多小胶质细胞从层状变为阿米巴状。此时，MHC II类也表达出来。此外，在一些表达这种MHC II类的阿米巴样小胶质细胞中观察到iNOS蛋白的表达，并且还产生大量NO。另一方面，iNOS mRNA 表达（RT-PCR 分析）在 LPS 和 IFN-γ 共同给药后 6 小时达到最大值。另一方面，iNOS蛋白持续增加直至24小时后，观察到产生大量NO。当单独给予LPS或IFN-γ时，注射部位周围的一些小胶质细胞从层状型变为amevoid型，并表达MHC II类，但没有观察到iNOS蛋白的表达。此外，给予无菌生理盐水后，小胶质细胞没有发生变化，仍保持层状类型。因此，体内系统比体外系统更不可能诱导 iNOS。换句话说，它不是通过单独施用LPS或IFN-γ来诱导的，而是仅通过组合刺激来诱导。此外，LPS和IFN-γ共同给药3天后，iNOS和MHC II类的表达消失，但MHC I类在阿米巴小胶质细胞中较晚表达。此外，一周后诱导海马神经元死亡。上述结果提示，脑损伤时小胶质细胞活化诱导iNOS产生大量NO，神经元功能可能加剧。