免疫不全ウイルスに特異的な粘膜免疫の誘導と解析

免疫缺陷病毒特异性粘膜免疫的诱导和分析

基本信息

批准号：
08771641
负责人：
川端重忠
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771641/
关键词：
SIV 粘膜免疫 T細胞 Th1・Th2 サイトカインワクチン IgA

项目摘要

粘膜面においてTh2系T細胞の産生するIL-5およびIL-6が分泌型IgA産生細胞を誘導することは知られている。このTh2型サイトカインを効率良く誘導できるかが、粘膜面において分泌型IgA産生B細胞を分化、増殖させる鍵になる。粘膜系とともに全身系の免疫能を賦活するほうが感染防御の意味からも重要である。そこで、本実験ではHIV感染モデルとしてサルを被験動物とし、HIV-2に類似したSIVあるいはそのタンパク抗原を全身系および粘膜系免疫応答を期待して泌尿生殖器関連リンパ節近傍に投与し、抗原特異的な免疫応答が誘導できるかBおよびT細胞レベルで検討した。1、ホルマリン処理した失活SIVあるいは、SIVgp120およびp27タンパクを免疫賦活剤(水酸化アルミニウム)とともに泌尿生殖器関連リンパ節近傍に免疫した結果、2回目および3回目のブ-スト後末梢血中に抗原特異的IgA、およびIgG価を抗原特異的Ig-ELISPOTおよびELISA法を用いて検出できた。特に、p27タンパクに対する抗体価は、SIVあるいはgp120に比べて相対的に高かった。2、末梢血のPBMCをSIVp27で4日間刺激し、B細胞およびT細胞の解析を行った。分画されたCD4^+T細胞をサイトカイン特異的ELISPOT法(Th1;IFN-γおよびTh2;IL-4)に供した。その結果、Th1およびTh2系のサイトカイン産生細胞が観察され、ブ-スト後はTh2型に移行する傾向が現れた。さらに、これらT細胞よりRNAを分離し、サーマルサイクラ-を用いたRT-PCR法により、各種サイトカイン特異的mRNAの発現を調べた。mRNAレベルにおいても、Th2型(IL-4、IL-5、IL-6)サイトカインが非免疫群に比べ、有意に高く発現していた。今回の結果をふまえて、さらに強力に抗原特異的IgAを各粘膜面において誘導するため、経口免疫の実験を現在計画している。

众所周知，由Th2型T细胞在粘膜表面产生的IL-5和IL-6诱导分泌的IgA产生细胞。有效诱导这种Th2型细胞因子是分化和粘液表面上分泌的IgA生产B细胞的关键。在感染意义上，用粘膜系统激活整个身体的免疫能力更为重要。因此，在此实验中，猴子被用作HIV感染的模型，SIV与HIV-2相似，或者其蛋白质抗原被泌尿生殖淋巴结附近，以期预期整个身体和粘膜免疫反应，并进行抗原特异性在B和T细胞水平上检查了是否可以诱导免疫反应。 1。由于免疫淋巴结的免疫力，以及免疫原状淋巴结，免疫淋巴结淋巴结以及免疫剂（氢氧化铝），第二和第三个voppers holmalin proccocessed sivgp120和p27 protein使用抗原特异性Ig-Elispot和ELISA方法检测到IgG值。特别是，P27蛋白的抗体价格相对较高，高于SIV或GP120。 2。SIVP27刺激外周血PBMC四天，并分析了B细胞和T细胞。分裂的CD4^+T细胞应用于细胞因子特异性ELISPOT方法（TH1； IFN-γ和Th2; IL-4）。结果，观察到Th1和Th2系列细胞因子产生细胞，在胸围袭击后，出现了转移到Th2的趋势。此外，将RNA与这些T细胞分离，并使用热循环通过RT-PCR方法检查了各种细胞因子特异性mRNA的表达。在mRNA水平上，与非免疫组相比，Th2（IL-4，IL-5，IL-6）细胞因子显着表达。基于此结果，目前计划进行一个口服免疫实验，以在每个粘膜上诱导抗原特异性IgA。