くも膜下出血後脳血管れん縮期の脳脊髄液中ユビキチン存在様式の検討

蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛期间脑脊液中泛素的检测

• 批准号: 08771098
• 负责人: 上久保 毅
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771098/
• 关键词: Ubiquitin; SAH; CSF

ユビキチンは、複数の酵素の作用によりATP依存性に細胞内の短寿命蛋白質や異常蛋白質に結合し、産生されたユビキチン蛋白質はマルチユビキチン化反応を生じ、ATP依存性の26Sプロテアソームにより分解されます。近年、生体内でのユビキチンの存在様式には遊離型(free ubiquitin)と結合型(multi ubiquitin)があり、それぞれ異なる機能があることが判明してきました。一方、くも膜下出血後に脳血管れん縮を来すことは周知の事実ですが、その機序について分子レベルでの解明はなされていません。そこで今回、試料としてくも膜下出血後の脳脊髄液を経時的に採取し、その脳脊髄液中のユビキチンの存在様式を定量化しました。1) Free ubiquitin RIA試料をヨード化-遊離ユビキチン(^<125>I)、抗ユビキチンポリクローナル抗体US-1を用いて、その反応後の放射活性を測定し、Free ubiquitinの定量とする。2) Multi-ubiquitin chain EIA抗マルチユビキチン鎖モノクローナル抗体FK2をABC法にて発色させ吸光度(450nm)測定しMulti-ubiquitin chainの定量とします。現在、症例数の関係から統計学的な有意差についての検討はできませんが、脳血管れん縮期に相当する出血後7日目前後に遊離型(free ubiquitin)の増加が認められる傾向があります。また結合型(multi ubiquitin)については比例して多少の増加を認める傾向がありました。

泛素通过多种酶的作用以ATP依赖性方式与短寿命的蛋白质和异常蛋白结合，并且产生的泛素蛋白会产生多泛素化反应，该反应由ATP依赖性26S蛋白酶体降解。近年来，已经发现，人体中存在泛素的模式是免费的和多泛素的，并且每个泛素具有不同的功能。另一方面，众所周知，大脑血管素发生在亚蛛网膜下腔出血后发生，但是该机制的机制尚未在分子水平上阐明。因此，随着时间的流逝，我们已作为样本收集了蛛网膜下腔出血后的脑脊液，并量化了脑脊液中泛素的存在方式。 1）使用无碘的泛素（^<125> I）和抗泛素多克隆抗体US-1测量游离泛素RIA样品US-1，以测量反应后的放射性，并定量确定游离泛素。 2）多泛素链使用ABC方法开发了EIA抗杂化蛋白链单克隆抗体FK2，并测量吸光度（450 nm）来量化多泛素链。目前，由于病例数量之间的关系，无法考虑统计学上的显着差异，但是在出血后的第7天左右，游离泛素的趋势会增加，这对应于脑血管质质蛋白收缩性大脑系统收缩科收缩趋势。此外，多泛素类型的成比例增加趋势。