スタチン誘発骨格筋障害と細胞外ATP濃度の相関性

他汀类药物所致骨骼肌损伤与细胞外ATP浓度的相关性

• 批准号: 19924022
• 负责人: 小野 委成
• 金额: $ 0.47万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19924022/
• 关键词: スタチン; 骨格筋; ATP

【研究目的】HMG-CoA還元酵素阻害薬のスタチンは、高脂血症治療薬として汎用されているが、副作用として横紋筋融解症を誘発する。一方、細胞外ATPはP2受容体を介して細胞内Ca^<2+>濃度を上昇させ、多彩な生理作用を示すことが報告されている。また、細胞障害時には細胞外にATPが漏出する事も知られている。本研究では、スタチン誘発骨格筋障害時に細胞外へのATP漏出が認められるのか。さらに、骨格筋に存在するP2受容体mRNA発現量に対してスタチンは影響を与えるのかを検討した。【研究方法】ラット骨格筋(短指屈筋)を摘出し、コラゲナーゼ処理で得た単一骨格筋繊維を電気刺激(2Hz,5msec,10V,50秒間)した。細胞外ATP濃度は、ルシフェリン・ルシフェラーゼ法で測定した。トリパンブルー染色で骨格筋繊維の障害程度を観察した。P2受容体mRNA発現量は、摘出した骨格筋からRNAを抽出しリアルタイムRT-PCR法を用いて行った。スタチン処理は、摘出した骨格筋または単一骨格筋繊維の培養液にフルバスタチン(10μM)を加え72時間行った。また、対照にはフルバスタチン非存在群を用いた。【研究成果】電気刺激による収縮反応で細胞外へのATP漏出が認められた(0.9±0.9fmole/cell)。スタチン群では、収縮反応によるATP漏出が約31倍増加(27.9±11.6fmole/cell)し、有意差(Mann-Whitney検定、P<0.01)が認められた。P2受容体mRNA発現は、P2X4,P2Y1,P2Y2,P2Y4,P2Y6およびP2Y12が認められた。スタチン群では、P2X4 mRNAの発現が約1/40に強く抑制された。以上のことより、スタチン誘発骨格筋傷害時には、細胞外にATPが漏出し易くなるとともにP2受容体mRNA発現量に変化が認められたが、その役割については詳細な検討が必要である。

[研究目的]他汀类药物是一种HMG-COA还原酶抑制剂，通常用作治疗高脂血症的药物，但作为副作用，它会诱导横纹肌溶解。另一方面，据报道，细胞外ATP通过P2受体增加了细胞内Ca^<2+>的浓度，并表现出多种生理作用。众所周知，在细胞损伤期间，ATP从细胞中泄漏。在这项研究中，在他汀类药物引起的骨骼肌损伤期间观察到细胞外ATP泄漏？此外，我们研究了他汀类药物是否对骨骼肌中存在的P2受体mRNA的表达水平有影响。 [研究方法]去除大鼠骨骼肌（屈肌黑色素瘤），并通过胶原酶处理获得的单个骨骼肌纤维进行电刺激（2Hz，5msec，5msec，10V，50秒）。细胞外ATP浓度通过荧光素 - 卢酸酶方法测量。用锥虫蓝色染色观察到骨骼肌纤维障碍的程度。 P2受体mRNA的表达水平是通过从切除的骨骼肌中提取RNA并使用实时RT-PCR进行的。通过在去除的骨骼肌或单个骨骼肌纤维的培养基中添加Fluvastatin（10μM），进行他汀类药物的处理72小时。此外，没有Fluvastatin的组用作对照。 [研究结果]在电刺激引起的收缩反应中观察到ATP泄漏到细胞（0.9±0.9fmole/Cell）。在他汀类药物组中，由于收缩反应引起的ATP泄漏增加了约31倍（27.9±11.6fmole/Cell），差异很大（Mann-Whitney检验，p <0.01）。 P2受体mRNA表达观察到P2X4，P2Y1，P2Y2，P2Y4，P2Y6和P2Y12。在他汀类药物组中，P2X4 mRNA的表达受到约1/40的强烈抑制。结果，在他汀类药物诱导的骨骼肌损伤中，ATP倾向于从细胞中泄漏，并且观察到P2受体mRNA的表达水平的变化，但是必须详细研究这一点的作用。