選択的好中球枯渇化抗体(RP-3)対応抗原の血球系細胞における発現検証

验证血细胞中选择性中性粒细胞消耗抗体 (RP-3) 对应抗原的表达

基本信息

批准号：
18H00446
负责人：
黒澤大
金额：
$ 0.34万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18H00446/
关键词：
選択的好中球枯渇化抗体(RP-3)妊娠血球系細胞

项目摘要

好中球は生体に侵入してきた細菌などの異物をその貪食能によって排除することが良く知られている。近年、このような生体防御機能に加え、他の細胞群との相互作用により多様な生命現象に関与することが判明しつつある。しかし、この細胞の性差における機能差や妊娠時における役割については殆ど明らかになっていない。生体内におけるこの細胞の機能検討のために、これまで選択的好中球枯渇化抗体(RP-3)を用いた多くの研究がある。この抗体はラットにおいては腹腔内投与により、好中球を枯渇化できるが、その作用機序は未だに不明な点が多い。予備実験において、妊娠時の好中球の機能解析のために、この抗体を用いて枯渇化実験を試みたところ、予想に反し妊娠ラットにおいてはこの抗体の好中球枯渇化能は著しく変動する事を見いだした。本研究では、上記の事実に基づき、妊娠末期、特に分娩期における好中球の機能を明らかにすることを最終目標にしている。これまでRP-3対応抗原の局在は判明していない。本研究においては、まずこの抗原分子の血球系細胞においての発現分布を明らかにすることを目的とした。これらの細胞におけるRP-3対応抗原の発現を検討するため、非妊娠♀ラットの末梢血好中球分画を好中球マーカー(CD11b、およびRP-1)で染色し、フローサイトメーターにより解析した。その結果、未固定のほぼ全てのCD11b陽性細胞はRP-3陽性であった。RP-1抗体は好中球活性化マーカーで、通常は膜表面には検出されない。このマーカーについては膜透過処理したところ、こちらもほぼ全てのRP-1陽性細胞においてRP-3陽性であった。今後は更に各血球系細胞の特異的マーカーを用い、RP-3対応抗原の発現細胞、および部位を明らかにする予定である。

众所周知，中性粒细胞利用其吞噬能力来清除侵入生物体的细菌等异物。近年来，人们已经清楚，除了这些生物防御功能外，细胞还通过与其他细胞群的相互作用参与多种生物现象。然而，人们对这些细胞在性别之间的功能差异及其在怀孕期间的作用知之甚少。迄今为止，已有许多研究使用选择性中性粒细胞消耗抗体（RP-3）来研究这些细胞的体内功能。这种抗体可以通过腹腔注射消除大鼠的中性粒细胞，但其作用机制仍然很大程度上未知。在初步实验中，我们尝试使用该抗体进行消耗实验来分析怀孕期间中性粒细胞的功能，结果发现，与预期相反，该抗体消耗中性粒细胞的能力在怀孕大鼠中存在显着差异。基于以上事实，本研究的最终目的是阐明中性粒细胞在妊娠末期，特别是分娩期的功能。到目前为止，RP-3 相容抗原的定位尚未确定。在本研究中，我们首先旨在阐明该抗原分子在血细胞中的表达分布。为了检查这些细胞中 RP-3 相容抗原的表达，使用中性粒细胞标记物（CD11b 和 RP-1）对非妊娠雌性大鼠的外周血中性粒细胞部分进行染色，并使用流式细胞仪进行分析。结果，几乎所有未固定的CD11b阳性细胞均为RP-3阳性。 RP-1 抗体是中性粒细胞激活标记物，通常在膜表面检测不到。当该标记物被透化时，几乎所有 RP-1 阳性细胞都是 RP-3 阳性。将来，我们计划使用每种血细胞类型的特定标记来阐明表达 RP-3 相容抗原的细胞和位点。