統合失調症におけるADAMTS-3の機能解明

ADAMTS-3 在精神分裂症中的功能阐明

• 批准号: 17H00511
• 负责人: 常浦 祐未
• 金额: $ 0.35万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17H00511/
• 关键词: ADAMTS-3; 統合失調症; Reelin

【研究目的】統合失調症は幻覚、妄想、意欲低下・自発性の欠如、認知機能障害を主症状とする精神疾患である。発症メカニズムについて様々な仮説が提唱されているが、明確な病因はいまだに解明されていない。Reelinは脳の正常な神経構造形成や記憶・学習等の機能発現に重要な役割を担う細胞外マトリックス糖タンパクの一種であり、統合失調症患者脳内のReelinタンパクやmRNA発現量の低下が報告されている。a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 3(ADAMTS-3)はReelinを特異的に分解して不活化するプロテアーゼであり、脳に高発現することが分かっている。本研究では、成熟期の脳におけるADAMTS-3のRcclin分解活性と統合失調症との関連を検証し、統合失調症の新規治療法の開発を目的とした。【研究方法】ADAMTS-3遺伝子ノックダウンマウスの作製は、レンチウイルスを用いてADAMTS-3遺伝子のshort-hairpinRNA(shRNA)を成熟期マウス脳内に導入し、ADAMTS-3遺伝子ノックダウンマウスを作製した。ADAMTS-2およびADAMTS-3 mRNA発現量はリアルタイムPCR法によって測定した。ADAMTS-3遺伝子ノックダウンによるタンパク質の発現レベルに与える影響を調べるため、ノックダウンマウスの脳からサンプルを調製し、ウエスタンブロッティング法によってReelin及びReelinの下流に存在し記憶等の脳の高次機能に関わるDablのタンパク質発現量の変化を調べた。【研究成果】ADAMTS-3ノックダウンマウスの脳内では、ADAMTS-3 mRNA発現量がコントロールの約60%まで減少した。一方、ADAMTS-2およびReelinのmRNA発現量に有意な変化は認められなかった。ADAMTS-3ノックダウンマウスの脳内Reelin及びDab1のタンパク質発現量についても大きな変化は認められなかった。ADAMTS-3単独のノックダウンでは脳内Reelinを増加させることは困難であるため、他のアイソザイムも合わせてノックダウンする必要があると考えられる

[研究目的]精神分裂症是一种精神疾病，其主要症状是幻觉，妄想，动机下降，缺乏自发性和认知功能障碍。已经提出了关于发作机制的各种假设，但尚未澄清明确的病因。 reelin是一种细胞外基质糖蛋白，在大脑中正常神经结构的形成以及记忆和学习等功能的表达中起重要作用，并且据报道，reelin蛋白蛋白蛋白和mRNA表达水平已减少。具有血小板蛋白基序3（ADAMTS-3）的分解蛋白和金属蛋白酶是一种特异性降解和失活的蛋白酶，已知在大脑中高度表达。这项研究检查了成熟大脑和精神分裂症中ADAMTS-3 RCCLIN降解活性之间的关联，并旨在开发一种用于精神分裂症的新型治疗方法。 [研究方法]为了创建ADAMTS-3基因敲低小鼠，ADAMTS-3基因短毛RNA（SHRNA）使用慢病毒引入成熟的小鼠大脑中，以产生ADAMTS-3基因敲除小鼠。通过实时PCR测量ADAMTS-2和ADAMTS-3 mRNA表达的量。为了研究ADAMTS-3基因敲低对蛋白质表达水平的影响，从敲低小鼠的大脑中制备样品，并通过蛋白质印迹，研究了reelin下游的DABL的蛋白质表达水平的变化，并参与了较高的脑功能，例如记忆等较高的大脑功能。 [研究结果]在ADAMTS-3敲低小鼠的大脑中，ADAMTS-3 mRNA表达水平降低到约60％的对照。另一方面，ADAMTS-2和reelin的mRNA表达水平没有明显变化。在ADAMTS-3敲低小鼠中，reelin和dab1的蛋白质表达水平未观察到显着变化。由于仅用ADAMTS-3的敲低就很难增加脑relin，因此人们认为应该将其他同工酶击倒在一起。

项目成果

マウスの脳内におけるリーリン分解酵素ADAMTS2/3ノックダウン法の検討

小鼠脑内Reelin降解酶ADAMTS2/3敲低方法的检测

• 发表时间: 2017
• 作者: 常浦祐未;北川佳奈子;高瀬冴子;伊藤教道;永井拓;山田清文
• 通讯作者: 山田清文