皮膚特異的遺伝子破壊法によるGPIアンカー型蛋白の角層形成に及ぼす影響

皮肤特异性基因破坏法研究GPI锚定蛋白对角质层形成的影响

基本信息

批准号：
10770406
负责人：
樽谷勝仁
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

GPI-アンカー型蛋白とは哺乳類細胞細胞膜上に広く分布する多様な糖蛋白の総称である。X染色体上に存在するPig-a遺伝子の産物はGPI-アンカー生合成の初期段階で必須の働きをしている。以前我々は組織特異的にジーンターデッティングを行うことができるCre-loxPシステムを用いて表皮特異的にPig-aを欠損させたマウスを作製した。この表皮特異的Pig-aノックアウトマウスは出生直後より皮膚が全体的に乾燥し組織学的に角層の異常が認められた。この異常所見が角層の脂質代謝の異常からきていると考え、野生型マウスとGPI-アンカー欠損マウスの角層より脂質を抽出し、薄層クロマトグラフィーを展開することにより比較検討した。その結果GPI-アンカー欠損マウスで増加している脂質のスポットが検出された。この異常に増加している脂質がマススペクトロメーターによりフォスファチジン酸であることが同定できた。このことより表皮角層におけるフォスファチジン酸の代謝にGPI-アンカー型蛋白が関与していることが示唆された。またこのGPI-アンカー欠損マウスは生後2-3日で死亡してしまう。そこでこのマウスの表皮をヌードマウスに移植して経時的にその表皮の変化を野生型マウスと比較検討した。その結果肉眼的にGPI-アンカー欠損マウスでは野生型マウスで見られるような毛の成長が見られなかった。組織学的にこのマウスの皮膚を観察するとこのマウスの毛包内はケラチンで充満されていた。このため毛の成長が妨げられているのではないかと考えられた。このマウスは遺伝性角化異常症の1型であるharlequin ichthyosisと類似しているため、今後その類似点、及びどのGPI-アンカー型蛋白がこの角層異常をおこしているかを検討予定である。

GPI锚蛋白是广泛分布在哺乳动物细胞细胞膜上的多种糖蛋白的一般术语。存在于X染色体上的PIG-A基因的产物在GPI锚生物合成的早期阶段起着至关重要的作用。以前，我们使用允许组织特异性发电机的Cre-loxp系统生成了表皮特异性的猪-A缺陷小鼠。表皮特异性的猪-A敲除小鼠从出生后立即立即具有总体干皮肤，并且观察到角质层的组织学异常。这种异常发现被认为是由于角质层中脂质异常的代谢引起的，并从野生型小鼠的角质层和GPI牢固缺乏的小鼠中提取脂质，然后通过薄层色谱法进行比较。结果，在缺乏GPI锚的小鼠中检测到脂质斑点增加。通过质谱仪将这种异常增加的脂质鉴定为磷脂酸。这表明GPI锚蛋白参与表皮角层角膜层中磷脂酸的代谢。此外，这些GPI锚定小鼠出生后2-3天死亡。因此，将该小鼠的表皮移植到裸鼠中，并将表皮的变化与野生型小鼠进行比较。结果，GPI牢房缺乏的小鼠没有显示出野生型小鼠所见的任何头发生长。从组织学上讲，观察小鼠的皮肤时，小鼠毛囊的内部充满角蛋白。这可能阻碍了头发的生长。这只小鼠类似于雌激素鱼质病（遗传性心脏病的1型），因此我们将研究其相似性以及哪种GPI-bandor型蛋白在未来引起这种角膜层异常。