小児Malignant Rhabdoid Tumorの細胞生物学的特性について

关于小儿恶性横纹肌样瘤的细胞生物学特性

基本信息

批准号：
10770345
负责人：
鈴木淳史
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Shiga University of Medical Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

悪性横紋筋様腫瘍(Malignant rhabdoid tumor、以下MRTと略す)の細胞株を用いて、増殖因子およびその受容体について調べ、そのオートクラインの詳細な特性を検討した。方法は5つの培養細胞株(TM87-16,STM91-01,TTC549,TTC642,YAM-RT)を使用し、RT-PCRによりtransformation growth factorα(TGF-α),epidermal growth factor(EGF),及びepidermal growth factor receptor(EGFR)のmRNAの発現について検索した。また、TPAによる分化誘導後にそれぞれのmRNAの定量をcompetitive PCRにて行なった.さらに、TGF-α,EGF,EGFR抗体の添加による細胞培養で細胞増殖を検討した。結果は5株のうちTM87-16,STM91-01,TTC549,TTC642の4株はTGF-α/EGFRオートクラインであり、分化誘導によりTGF-αmRNAのdown regulationを認めた。YAMRTの1株はEGF/EGFRオートクラインであり、EGFmRNAのdown regulationを認めた。しかしTTC549の1株は分化誘導によりTGF-αmRNAのdown regulationを認めたが同時にEGFmRNAの発現をも認めた。抗体添加による細胞培養ではTM87-16,STM91-01,TTC642の3株ではTGF-α抗体により著明な増殖抑制が認められた。同様にYAMRTの1株ではEGF抗体により著明な増殖抑制が認められた。これに対してTTC549ではTGF-α抗体では増殖抑制が認めず、TGF-α、EGF抗体の両方の添加によりはじめて増殖抑制が認められた.以上の結果より、MRT細胞株においてはTGF-α/EGFRまたはEGF/EGFRの2つの型のオートクライン機構が存在していること、TTC549の1株はTGF-α/EGFRまたはEGF/EGFRの二重支配により制御されていることが示唆された。

使用恶性横纹肌瘤（以下简称MRT）细胞系，我们研究了生长因子及其受体，并研究了其自分泌特性的详细特征。该方法使用5种培养细胞系（TM87-16、STM91-01、TTC549、TTC642、YAM-RT）通过RT-法检测转化生长因子α（TGF-α）、表皮生长因子（EGF）和表皮生长因子。 PCR。我们搜索了生长因子受体（EGFR）mRNA 的表达。此外，在用TPA进行分化诱导后，通过竞争性PCR对每种mRNA进行定量。此外，在添加TGF-α、EGF和EGFR抗体的细胞培养物中检查细胞增殖。结果，TM87-16、STM91-01、TTC549和TTC642这5个菌株中的4个是TGF-α/EGFR自分泌的，并且在诱导分化时观察到TGF-αmRNA的下调。 YAMRT的一株是EGF/EGFR自分泌的，并且观察到EGF mRNA的下调。然而，在TTC549的一种菌株中，在诱导分化时观察到TGF-α mRNA的下调，但同时也观察到EGF mRNA的表达。在添加抗体的细胞培养物中，TGF-α 抗体在 TM87-16、STM91-01 和 TTC642 三种菌株中观察到显着的生长抑制。类似地，在 YAMRT 的一种菌株中，EGF 抗体观察到显着的生长抑制。另一方面，在TTC549中，使用TGF-α抗体没有观察到生长抑制，并且在添加TGF-α和EGF抗体两者的情况下首次观察到生长抑制。从以上结果可以看出，TGF-α/It有人认为存在两种类型的自分泌机制，EGFR或EGF/EGFR，并且TTC549的一种菌株受到TGF-α/EGFR或EGF/EGFR的双重控制。