Molecular basis of cognitive aging caused by perturbed endocannabinoid system

内源性大麻素系统紊乱引起认知衰老的分子基础

• 批准号: 22K17815
• 负责人: 片岡 孝介
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Waseda University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K17815/
• 关键词: 内在性カンナビノイド系; 加齢性記憶障害; オミクス解析

先進国で高齢化が加速度的に進む中で老化研究の重要性は高まりつつある。助成対象者は、脳老化に重要な内在性カンナビノイド系（ECS）に着目して、加齢性記憶障害の分子機構の解明を目指している。助成対象者は、ECSがミトコンドリア品質管理を担うことを発見したが、加齢性記憶障害におけるCB1受容体の役割は依然として不明である。本研究では、ECSの一つであるCB1受容体が細胞内局在依存的な生理機能を有することに着目し、加齢性記憶障害におけるCB1受容体の役割を有するか明らかにすることを目的としている。当該年度は、SH-SY5Y細胞を用いて、異なる膜透過性・CB1受容体作用を示す3つのカンナビノイドを使用して、CB1受容体の細胞内局在依存的な活性化や不活性化が、ミトコンドリアの機能にどのような影響与えるのか検証した。その結果、ミトコンドリア膜電位や形態、ATP産生量、ROS産生量等が、カンナビノイドの膜透過性やCB1受容体への作用に異なる影響を及ぼすことが明らかとなった。さらに、CB1受容体への依存性を検証するために、SH-SY5Y細胞においてCRISPR-Cas9を用いたCB1受容体遺伝子のノックアウトを試みた。シークエンス結果から、クローンに由来する複数のノックアウト細胞株を作製することに成功した。

随着发达国家人口老龄化，老龄化研究变得越来越重要。受资助者旨在阐明与年龄相关的记忆障碍的分子机制，重点关注对大脑衰老很重要的内源性大麻素系统（ECS）。受资助者发现 ECS 负责线粒体质量控制，但 CB1 受体在与年龄相关的记忆障碍中的作用仍不清楚。在本研究中，我们重点关注ECS之一的CB1受体的生理功能取决于其在细胞内的位置，旨在阐明CB1受体是否在与年龄相关的记忆障碍中发挥作用。据说在本财年，我们使用 SH-SY5Y 细胞来证明 CB1 受体的细胞内定位依赖性激活和失活，使用三种表现出不同膜渗透性和 CB1 受体作用的大麻素，我们研究了它如何影响线粒体功能。结果表明，线粒体膜电位、形态、ATP产生、ROS产生等因素对大麻素的膜通透性及其对CB1受体的影响有不同的影响。此外，为了验证对CB1受体的依赖性，我们尝试在SH-SY5Y细胞中使用CRISPR-Cas9敲除CB1受体基因。根据测序结果，我们成功创建了多个源自克隆的敲除细胞系。

项目成果

Subcellular localization-dependent function of cannabinoid CB1 receptor in mitochondria

线粒体中大麻素 CB1 受体的亚细胞定位依赖性功能

• 发表时间: 2022
• 作者: 森一明;森一明;森一明
• 通讯作者: 森一明

ミトコンドリアにおけるカンナビノイド受容体CB1が果たす細胞内局在依存的な役割

大麻素受体 CB1 在线粒体中的亚细胞定位依赖性作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 森一明;森一明
• 通讯作者: 森一明