多系統細胞に効率的に分化する歯髄幹細胞分画の純化とその抗炎症作用の解明

有效分化为多系细胞的牙髓干细胞组分的纯化及其抗炎作用的阐明

基本信息

批准号：
22K17080
负责人：
原基
金额：
$ 2.75万
依托单位：
The Nippon Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

間葉系幹細胞(MesenchymalStemCell;MSC)は多くの細胞系統に分化し、有力な再生医療の細胞資源である。歯髄幹細胞とは、歯の歯髄組織に含まれる幹細胞のことである。幹細胞は、さまざまな細胞に分化できる細胞であり再生医療での重要な役割を果たしている。歯髄幹細胞は、自然脱落した乳歯や抜去智歯の歯髄から比較的簡単に単離できることや、神経や血管に分化しやすいことなどが特徴である。また骨髄採取などに比較して費用や侵襲性が少なく、特に優れた細胞資源と考えている。特に申請者が所属する日本歯科大学では歯の細胞バンク事業を行っている。申請者らはこれまで歯髄MSCが、肝細胞形質を有する細胞に分化し、動物モデルにおいて重症肝炎を改善する効果があることを明らかにしてきた。本研究の目的は歯髄細胞から多彩な分化能を示すMSC細胞集団を効率的に抽出し、様々な細胞へと分化させる効率的かつ費用対効果に優れた精製＋分化アルゴリズムの確立を目指し、既に運用されているバンク事業の実用化に向けたステップとすることである。実際には倫理委員会での承認を得たうえで、ヒト歯髄間葉系幹細胞の細胞増殖曲線を明確にし、肝細胞様細胞に効率よく分化させる方法を検証している段階である。しかしながら歯髄MSCの増殖曲線による適当な増殖能と肝細胞様細胞への分化因子の至適な組み合わせを見出すことに苦慮しているのが現状である。今後はこの培養過程の安定したプロトコールを樹立したいと考えている。またFACSによる細胞表面マーカーの解析を勧め、多系統の細胞分化を担う幹細胞集団を効率的に同定する方法を開発したい。また、その過程でどのような転写因子が発現し、メチル化などのEpigeneticな変化が進行していくのかの基礎的なデータを蓄積していきたい。

间充质干细胞（MSC）分化为许多细胞系，是再生医学的重要细胞资源。牙髓干细胞是牙齿果肉组织中的干细胞。干细胞是可以区分各种细胞并在再生医学中起重要作用的细胞。牙髓干细胞的特征是它们从自发掉下乳牙或提取的智慧牙齿的果肉中相对容易隔离，并且很容易区分为神经和血管。它也被认为是一种特别出色的细胞资源，与骨髓收集相比，成本和侵入性较低。特别是，申请人所在的日本牙科大学经营牙科银行业务。申请人先前已经表明，纸浆MSC会以肝细胞性状分化为细胞，并具有改善动物模型中严重肝炎的作用。这项研究的目的是建立一种有效且具有成本效益的纯化和分化算法，该算法有效提取MSC细胞群体，这些MSC细胞种群具有从牙科纸浆细胞中表现出各种分化潜力，并将它们区分为各种细胞，并将其作为已经在运行中已经在运行中的银行业务实用的一步。实际上，我们目前正在伦理委员会获得批准，并阐明了人浆间充质干细胞的细胞增殖曲线，并验证有效分化为肝细胞样细胞的方法。但是，目前，基于牙髓MSC的增殖曲线，目前很难找到适当的增殖势和分化因子在肝细胞样细胞中的最佳组合。将来，我们想为这种文化过程建立稳定的协议。我们还想建议使用FACS对细胞表面标记进行分析，并开发一种有效识别负责多线细胞分化的干细胞群体的方法。我们还想积累有关在过程中表达哪些转录因子以及表观遗传变化（例如甲基化进展）的基本数据。