歯周病原細菌のHgp44合成ペプチドを用いた新規歯周炎治療法の開発

利用牙周病原菌Hgp44合成肽开发牙周炎治疗新方法

• 批准号: 22K17046
• 负责人: 吉川 幸輝
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K17046/
• 关键词: P. gingivalis; Hgp44; T. denticola; Porphyromonas gingivalis; Treponema denticola

主要な歯周病原細菌であるPorphyromonas gingivalis が産生するシステインプロテアーゼであるジンジパインの一部の RgpA は，プロテアーゼドメインおよび赤血球凝集/付着ドメインによって構成されている。我々の研究グループでは，この赤血球凝集/付着ドメインの一部である Hgp44のアミノ酸配列199-316領域にT. denticolaとの付着に主に関与する特定領域があることを報告した。本研究の目的は，P. gingivalisHgp44 199-316 領域からなる各合成ペプチドが，P. gingivalis と T. denticola のバイオフィルム形成に与える影響をin vitroで評価することである。P. gingivalis Hgp44のアミノ酸配列199-316領域から分割して15個の合成ペプチド（Pep1-15）を作製した。これらを用いてT. denticolaとの付着をELISA にて解析した。また，Pep1-15を用いて，P. gingivalis とT. denticolaとのバイオフィルム形成に与える影響を共焦点レーザー顕微鏡（C L S M）で観察した。ELISAにおいて，Pep5, 6, 7および15とT. denticola の付着は，control （合成ペプチド無添加時）に比較して有意に高かった。CLSMによる観察の結果，Pep14および15存在下において， P. gingivalis とT. denticola によって形成されるバイオフィルムの厚みがcontrol （合成ペプチド無添加時）と比較して有意に減少した。Pep15配列は，P. gingivalis Hgp44とT. denticolaの共凝集に関与することが示唆された。今後はPep15等を介した細菌間の物理的な結合により，バイオフィルム形成にどのような変化が生じるかを検討するための網羅的な遺伝子解析を行なう。

牙菊的某些RGPA是​​由主要的牙周致病细菌（卟啉单胞菌）产生的半胱氨酸蛋白酶，由蛋白酶结构域和血凝/粘附结构域组成。我们的研究小组报告说，HGP44的氨基酸序列199-316是该血凝/粘附域的一部分，其特定区域主要涉及与牙齿的牙霉菌。这项研究的目的是在体外评估每个合成肽的影响，该合成肽由P. gingivalishgp44 199-316区域对牙龈疟原虫和T. denticola的生物膜形成。通过将15种合成肽（PEP1-15）分配为牙龈疟原虫HGP44的氨基酸序列区域199-316产生。使用这些，通过ELISA分析了与牙霉菌的粘附。此外，使用PEP1-15，使用共聚焦激光显微镜（CL S M）观察到牙龈疟原虫和牙霉菌对生物膜形成的影响。在ELISA中，Pep5、6、7和15的附着以及牙齿的T. t. t。t。pectical明显高于对照（而无需添加合成肽）。 CLSM的观察结果表明，在存在Pep14和15的情况下，与对照相比（而不添加合成肽），由牙龈疟原虫和牙霉菌形成的生物膜的厚度显着降低。有人提出，pep15序列与牙龈疟原虫HGP44和T. denticola的凝集有关。将来，将进行全面的遗传分析，以检查细菌之间通过PEP15和其他这种变化在生物膜形成中如何发生物理结合。

项目成果

Porphyromonas gingivalis Hgp44 の付着ドメインが Treponema denticola とのバイオフィルム形成に与える影響

牙龈卟啉单胞菌 Hgp44 附着域对齿垢密螺旋体生物膜形成的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 吉川幸輝，国分栄仁; 北村友里恵;久永理央;山下慶子; 齋藤 淳，石原和幸
• 通讯作者: 齋藤 淳，石原和幸