病的新生血管の制御を目指した新規網膜器官培養法の開発

开发一种新的视网膜器官培养方法，旨在控制病理性新生血管形成

• 批准号: 22K16950
• 负责人: 高橋 静
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16950/
• 关键词: 内皮細胞; 網膜器官培養; ライブイメージング; 血管新生; 網膜; 器官培養

本研究では、マウス網膜の器官培養法を新たに開発し、発生期もしくは病的血管新生でみられる細胞動態を評価するため観察系の構築を目指す。本年度は、器官培養法の開発を試みた。予備研究で課題であった網膜の変形は、type1コラーゲンに網膜を埋め込むことで形状保持を可能とした。網膜血管の発生を再現できる網膜器官培養に適した培地ならびにサプリメントを検討した。生後4日の新生仔マウス網膜を種々の培地・サプリメントを用いて40%酸素濃度下に24時間培養した後、ホールマウント免疫染色により培養網膜の血管形態ならびに内皮数を生後5日マウス網膜のそれと比較した。神経系細胞に適したB27・N2サプリメントを添加した培地では血管伸長、血管径、血管分岐数のいずれも減少し、内皮細胞は数だけでなく配向にも凝集様の変化がみられた。一方、血管内皮細胞に適したVEGFとFGFを添加した培地では、血管伸長、血管径、分岐数は神経系の培地よりも有意に増加したが生後5日マウスと同等にはならなかった。このとき、抗a-SMA、抗NG2抗体による免疫染色においてペリサイトによる内皮細胞の被覆が障害されていたことから、さらにPDGF-BBを添加して培養したところ、生後5日マウス網膜の血管形態と同等となった。VEGF, FGF, PDGF-BBの３つのサイトカインと化合物を添加した培地を用いることで生体に類似した発生期の血管新生をex vivoで誘導することができた。

在本研究中，我们的目标是开发一种新的小鼠视网膜器官培养方法，并构建一个观察系统来评估发育期或病理性血管生成期间观察到的细胞动态。今年，我们尝试开发一种器官培养方法。视网膜变形是初步研究中的一个问题，通过将视网膜嵌入 1 型胶原蛋白中以保持其形状，使视网膜变形成为可能。我们研究了适合视网膜器官培养的培养基和补充剂，可以重现视网膜血管的发育。使用各种培养基和补充剂在 40% 氧气下培养 4 日龄新生小鼠视网膜 24 小时后，通过整体免疫染色将培养的视网膜的血管形态和内皮细胞数量与 5 日龄小鼠视网膜进行比较。 比较的。在添加了适合神经系统细胞的B27/N2补充剂的培养基中，血管伸长、血管直径和血管分支数量均减少，并且内皮细胞的数量和方向均出现聚集样变化。另一方面，在添加了适合血管内皮细胞的VEGF和FGF的培养基中，血管伸长、血管直径和分支数量与神经系统培养基相比显着增加，但没有达到与神经系统培养基相同的水平。在 5 天大的小鼠中。此时，抗a-SMA和抗NG2抗体的免疫染色显示周细胞对内皮细胞的覆盖受损，因此当添加PDGF-BB培养时，小鼠视网膜中血管的形态5出生后的天数被确认为相当于。通过使用补充有三种细胞因子和化合物：VEGF、FGF 和 PDGF-BB 的培养基，我们能够在体外诱导新生血管生成，类似于活体生物体。

项目成果

非典型的な網膜滲出斑にて発症したサイトメガロウイルス網膜炎の1例

非典型视网膜渗出物致巨细胞病毒性视网膜炎1例

• 发表时间: 2022
• 作者: Miyazawa Kosuke;Sakimoto Susumu;Kanai Masanori;Shiraki Akihiko;Takahashi Shizuka;Shiraki Nobuhiko;Maruyama Kazuichi;Sakaguchi Hirokazu;Nishida Kohji;高橋静
• 通讯作者: 高橋静

Cytomegalovirus-Induced Optic Neuritis Through Cerebrospinal Fluid Viral Transmission in an Immunocompetent Patient: A Case Report

免疫功能正常患者中巨细胞病毒通过脑脊液病毒传播引起的视神经炎：病例报告

• DOI: 10.1097/wno.0000000000001834
• 发表时间: 2023
• 期刊: Journal of Neuro-Ophthalmlogy
• 作者: Takahashi;Shizuka MD;PhD; Hashida;Noriyasu MD;PhD; Maruyama;Kazuichi MD;PhD; Omura;Rina MD; Sakurai;Rei MD; Morimoto;Takeshi MD;PhD; Nishida;Kohji MD;PhD
• 通讯作者: PhD

Embedding Technique versus Conventional Internal Limiting Membrane Peeling for Lamellar Macular Holes with Epiretinal Proliferation

包埋技术与传统内界膜剥离术治疗伴有视网膜前增殖的板层黄斑裂孔

• DOI: 10.1016/j.oret.2022.07.009
• 发表时间: 2023
• 期刊: Ophthalmology Retina
• 影响因子: 4.5
• 作者: Kanai Masanori;Sakimoto Susumu;Takahashi Shizuka;Nishida Kentaro;Maruyama Kazuichi;Sato Shigeru;Sakaguchi Hirokazu;Nishida Kohji
• 通讯作者: Nishida Kohji