卵巣明細胞癌に対するCarbonyl reductase 1遺伝子治療の有効性

羰基还原酶1基因治疗卵巢透明细胞癌的疗效

• 批准号: 22K16848
• 负责人: 大澤 有姫
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16848/
• 关键词: 卵巣癌; 遺伝子治療; 子宮頸癌; ヒトパピローマウイルス; ddPCR

子宮頸癌患者における血漿中のヒトパピローマウイルス(HPV)を定量化し、予後予測マーカーとしての有用性の検討をしている。血漿中の血液遊離遺伝子(cell-free DNA; cfDNA)が近年、癌の早期発見や治療効果予測に有用なバイオマーカーとして注目されている。また子宮頸癌はほとんどがHPVの持続感染が原因とされている。子宮頸癌のリスクとなるHPVはHPV16・18型が最も多い。HPVは8000塩基の二本鎖環状DNAウイルスであり、発癌機序にはE6、E7領域の遺伝子発現がある。HPVのE7領域をターゲットとしてdroplet digital PCR(ddPCR)にて高感度でHPV-cfDNAが検出されることから有用なバイオマーカーになりうるのではないかと考えられた。研究目的としては、実際の患者検体より治療前、治療後3ヵ月毎に血液を採取し、従来行われている腫瘍マーカーや画像検査と比較してcfDNAが新たなモニタリングとなるかを検討することである。本研究の基礎実験として、血漿サンプルに作成したHPV16・18型のE7領域の人工プラスミドを入れて、cfDNAを精製した。Bio-radで作成したプライマー・プローブを使用し、ddPCRで検出されるか検討を行ったところ、高感度に検出されることを確認した。次に、弘前大学大学院医学研究科倫理委員会で承認を得て(承認番号：2022-126) 、子宮頸癌および子宮頸癌の前癌病変である子宮頸部異形成の患者より治療前、治療後の血液検体を収集している。子宮頸癌症例は30例、子宮頸部異形成症例は20例を目標としていて、現時点で目標症例数の半数以上の同意が得られている。今後は実際の患者検体をddPCRで定量化し、解析を行っていく予定である。

我们正在量化宫颈癌患者血浆中的人乳头瘤病毒 (HPV)，并检查其作为预后标志物的有用性。血浆中的游离 DNA (cfDNA) 最近作为癌症早期检测和治疗效果预测的有用生物标志物引起了人们的关注。此外，大多数宫颈癌被认为是由持续的 HPV 感染引起的。 HPV 16 和 18 型是最常见的 HPV 类型，会带来宫颈癌的风险。 HPV是一种8000个碱基的双链环状DNA病毒，其致癌机制涉及E6和E7区的基因表达。由于针对 HPV E7 区域的液滴数字 PCR (ddPCR) 可以高灵敏度地检测 HPV-cfDNA，因此人们认为它可能是一种有用的生物标志物。该研究的目的是在治疗前和治疗后每三个月采集实际患者样本的血液，并将其与传统的肿瘤标志物和影像学测试进行比较，以检验cfDNA是否可以作为一种新的监测方法。作为本研究的基础实验，我们将含有 HPV 16 型和 18 型 E7 区域的人工质粒引入血浆样本和纯化的 cfDNA 中。使用Bio-rad创建的引物和探针，我们研究了它们是否可以通过ddPCR检测，并确认可以高灵敏度检测它们。接下来，经弘前大学医学研究生院伦理委员会批准（批准号：2022-126），对宫颈癌和宫颈发育不良（宫颈癌癌前病变）的患者在治疗前进行了检查。正在收集样本。目标病例数为宫颈癌30例、宫颈不典型增生20例，目前已获得一半以上目标病例数的同意。未来，我们计划使用 ddPCR 量化和分析实际患者样本。