Clarification of liquid factor-based regeneration mechanism in intervertebral disc regenerative therapy using bone marrow aspirate concentrate

阐明使用骨髓抽吸浓缩液进行椎间盘再生治疗中基于液体因子的再生机制

• 批准号: 22K16757
• 负责人: 筌場 大介
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16757/
• 关键词: 椎間板ヘルニア; 再生医療; 骨髄濃縮液; 高純度硬化性アルギン酸ゲル

高純度硬化性アルギン酸ゲルと骨髄濃縮液（Bone marrow apirate concentrate; BMAC）を併用した椎間板再生治療法の開発を目指している。組織再生メカニズムの解明に先行して、ビーグル犬の椎間板を対象とした性能評価試験を実施した。L1/2～L4/5椎間板を無処置コントロール、髄核摘出のみ、ゲル単独移植、ゲル+BMAC移植の4群に分けた。全身麻酔下に骨盤骨より骨髄液を採取し、遠心分離操作にてBMACを作成。さらにアルギン酸ゾルとBMACを混合し、移植マテリアルを作成した。該当椎間板に対し摘出術を行ない、摘出部にゲルまたはゲルとBMACを移植。移植24週後に安楽死させ、脊椎検体を摘出。MRI評価と組織学評価（H&E、Safranin-O）、免疫組織学的評価（Type I & II collagen）による変性定量評価を行った。その結果、MRI 評価では髄核摘出群およびゲル群と比較してBMAC併用群は有意に高信号が保持されており、椎間板内での水分が保持されていることが示された。また組織学的評価において、BMAC併用群では中心部の髄核および周囲の線維輪構造は無処置群に次いで保たれており、変性進行が有意に抑制されていることが示された。また免疫組織学的評価では、椎間板内の主な細胞外基質となるType II collagenと、髄核の変性進行に伴い増加するType I collagenの産生を評価する目的で各々の陽性細胞率を算出した。その結果、BMAC併用群においては、髄核摘出群およびゲル群と比較してType II collagen陽性細胞率は有意に高値であり、一方でType I collagen陽性細胞率は有意に低値であった。以上の結果から、ゲルとBMACの併用による変性進行の抑制と椎間板組織修復および再生効果が示された。

目的是开发一种纪律再生治疗，该治疗方法结合了可固化的高含量的ardivic酸和骨髓浓度（骨髓磷酸盐浓缩液； BMAC）。在阐明组织再生机制之前，对Beagle Dog的光盘进行了性能评估测试。 L1/2至L4/5折扣分为四组：前所未有的控制，仅凝胶，凝胶+BMAC移植。骨髓液是从大全麻醉下从骨盆骨中收集的，而BMAC是通过离心分离手术产生的。另外，通过混合精神酸盐和BMAC来产生移植材料。将凝胶，凝胶和BMAC移植到切开部分的切除部分。移植后24周死亡并去除脊柱样品。 MRI评估，组织评估（H＆E，Safranin-O）和通过免疫有机评估（I型和II胶原蛋白）进行退化数量评估。结果，MRI评估表明，与凝胶组和凝胶组相比，BMAC组合组被显着保留，并保留在光盘中。在组织评估中，证明BMAC组合组被保存在中央珍珠中，并在非治疗组之后可容纳第五个结构，并受到了显着抑制。在免疫组织评估中，计算每个阳性细胞速率是为了评估II型胶原蛋白的产生的目的，这是椎间盘和I型胶原蛋白的主要细胞外底物，该胶原蛋白的变化程度增加，它的变性程度是肺泡的变性，计算。结果，在BMAC组合组中，II型胶原蛋白阳性细胞速率显着高于细胞核和凝胶基团，而I型胶原蛋白阳性细胞速率显着低。从上述结果中，通过将凝胶和BMAC结合以及椎间盘的修复和再生效应抑制退化进展。