光受容体Opsin3を介した青色LED光による消化器癌薬剤耐性解除に関する研究

蓝光LED光通过光感受器Opsin3释放胃肠癌耐药性的研究

基本信息

批准号：
22K16465
负责人：
良元俊昭
金额：
$ 3万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16465/
关键词：
青色LED光大腸癌光受容体オプシン Opn3 腫瘍微小環境 CAF TAM 青色LED 薬剤耐性光治療

项目摘要

薬剤耐性には腫瘍微小環境が大きく関与しており青色光の腫瘍微小環境への影響を評価した。【方法】①HCT116のconditioned medium (CM)を用いヒト線維芽細胞を培養後、青色LED照射(465nm・30mW/cm2・30min)群と対照群に分け48時間後にCAFの活性を評価。さらにLED照射＋/－のCAF-CMでHCT-116の培養を行いmigration assay施行。②M0マクロファージをHCT-116のCMで48時間培養後、青色LED照射群とcontrol群に分けTAMの活性とOpn3発現について評価。さらにLED照射＋/－のTAM-CMでHCT-116の培養を行いmigration assay施行。③上記CAF/TAMのCMでHCT-116の培養を行いPD-L1発現について評価。④4週齢 BALB/cマウス直腸粘膜下にマウス大腸癌細胞CT-26を注入し、1週間後より青色LED(465nm・30mW/cm2・30min)/week照射し抗腫瘍効果を検討。【結果】①照射群でCAFのIL-6発現が有意に減少した。照射ありのCAF-CMで培養したHCT-116は遊走能が低下した。②照射群では対照群と比してCD163,CD206発現が低下し、またVEGF分泌が有意に減少した。照射ありのTAM-CMで培養したHCT-116は遊走能が低下した。PCRでCAF/TAMのOpn3発現を認めた。③CAF/TAMのCMで培養したHCT-116ではPD-L1発現が上昇し、照射ありのCAF/TAM-CMで培養したHCT-116のPD-L1発現は照射なしよりも低下した。④照射群では腫瘍サイズが減少し、M2マクロファージマーカー陽性のリンパ球が減少した。【まとめ】青色LED光は腫瘍微小環境に対しても抑制効果を発揮し腫瘍抑制に働きうることが示唆された。

肿瘤微环境很大程度上参与了耐药性，我们评估了蓝光对肿瘤微环境的影响。 [方法] ①使用HCT116条件培养基（CM）培养人成纤维细胞后，将其分为蓝色LED照射（465nm，30mW/cm2，30min）组和对照组，48小时后评估CAF活性。此外，HCT-116在LED照射+/-的CAF-CM中培养，并进行迁移测定。 ② HCT-116 CM 培养 M0 巨噬细胞 48 h 后，分为蓝色 LED 照射组和对照组，评价 TAM 活性和 Opn3 表达。此外，HCT-116在LED照射+/-的TAM-CM中培养，并进行迁移测定。 ③在上述CAF/TAM CM中培养HCT-116并评估PD-L1表达。 ④ 4周龄BALB/c小鼠直肠粘膜下注射小鼠结肠癌细胞CT-26，1周后，蓝色LED（465 nm，30 mW/cm2，30 min）/周照射，检查抗肿瘤作用。 [结果]①照射组CAF中IL-6表达显着降低。在 CAF-CM 中培养的 HCT-116 经照射后迁移能力下降。 ②照射组与对照组相比，CD163、CD206表达降低，VEGF分泌明显减少。在 TAM-CM 中培养的 HCT-116 经辐射后迁移能力下降。通过PCR证实CAF/TAM的Opn3表达。 ③CAF/TAM-CM培养的HCT-116中PD-L1表达增加，且经照射的CAF/TAM-CM培养的HCT-116中PD-L1表达低于未照射。 ④照射组肿瘤体积缩小，M2巨噬细胞标志物阳性淋巴细胞数量减少。 [摘要]蓝色LED光还对肿瘤微环境产生抑制作用，提示其具有抑制肿瘤的作用。