エピジェネティック調節によるT細胞制御に焦点をあてた免疫疾患の解明

通过表观遗传调控阐明 T 细胞控制的免疫疾病

• 批准号: 22K16349
• 负责人: 荒川 裕也
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Ehime Prefectural University of Health Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16349/
• 关键词: Phf2; 遺伝子欠損マウス; アトピー性皮膚炎; CD4 T細胞; エピジェネティクス; アレルギー; ヒストン修飾; T細胞; ノックアウトマウス; 免疫疾患

本研究では、ヒストンH3K9脱メチル化酵素Phf2に着目した研究を行っている。この酵素の遺伝子をT細胞特異的に欠損させたマウスを作製し、脾臓よりCD4 T細胞を分離した。このPhf2欠損CD4 T細胞を用いて2日間活性化培養を行った結果、野生型CD4 T細胞と比較してTh2細胞より産生されるIL4 mRNA発現の減少およびTh1細胞より産生されるIFN-γ mRNA発現の増加が認められた。一方、Th17細胞より産生されるIL-17 mRNAおよび細胞死抑制因子であるBcl-2 mRNAの発現には変化がみられなかった。これらの結果よりPhf2の欠損は、Th1分化の促進およびTh2分化の抑制を誘導し、Th17分化には影響しないことが示唆され、また細胞死にも影響しないことが示された。これらの成果を元に、アレルギー疾患の病態におけるPhf2の役割を明らかにするため、アトピー性皮膚炎モデルマウスを作製し、アレルゲンに対するアレルギー免疫反応の比較解析を進めた。具体的には、剃毛したマウスにアレルゲンとして卵白アルブミン（OVA）を1週間経皮感作させた後、２週間おいて再度１週間感作させる。この操作を繰り返し、３回目の感作終了後、血漿中のOVA特異的IgE濃度を測定した。その結果、野生型マウスと比較してPhf2欠損マウスにおける血漿中OVA特異的IgE濃度の減少を確認した。これらの結果より、Phf2欠損はTh2分化を抑制することによって、アレルギー免疫反応を抑制することが示唆された。

在本研究中，我们重点关注组蛋白 H3K9 去甲基化酶 Phf2。我们培育出 T 细胞中这种酶的基因被特异性删除的小鼠，并从它们的脾脏中分离出 CD4 T 细胞。使用这些 Phf2 缺陷型 CD4 T 细胞进行 2 天活化培养的结果是，与野生型相比，Th2 细胞产生的 IL4 mRNA 表达降低，Th1 细胞产生的 IFN-γ mRNA 表达降低。观察到-型CD4 T细胞的表达增加。另一方面，Th17细胞产生的IL-17 mRNA和细胞死亡抑制因子Bcl-2 mRNA的表达没有观察到变化。这些结果表明Phf2缺乏促进Th1分化并抑制Th2分化，但不影响Th17分化，也不影响细胞死亡。基于这些结果，为了阐明Phf2在过敏性疾病病理学中的作用，我们构建了特应性皮炎模型小鼠，并对过敏原的过敏免疫反应进行了比较分析。具体而言，将剃毛的小鼠以卵清蛋白(OVA)作为过敏原经皮致敏1周，两周后再次致敏1周。重复该操作，在第3次致敏后，测定血浆中的OVA特异性IgE浓度。结果，我们证实与野生型小鼠相比，Phf2 缺陷小鼠的血浆 OVA 特异性 IgE 浓度降低。这些结果表明 Phf2 缺乏通过抑制 Th2 分化来抑制过敏性免疫反应。