HBZ-宿主タンパク質結合のATL発がん機序における役割の解明

阐明HBZ-宿主蛋白结合在ATL致癌机制中的作用

• 批准号: 22K16325
• 负责人: 樋口 悠介
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16325/
• 关键词: HTLV-1; HBZ

HBZ発現細胞におけるIL-10シグナル経路活性化の影響を調べるため、HBZトランスジェニック(HBZ-Tg)マウスとIL-10ノックアウト(IL-10 KO)マウスを交配し、表現型の観察を行った。当初、IL-10 KOマウスとHBZ-Tgマウスを交配することで、HBZ-Tgマウスにおける炎症が抑制されると考えたが、実際には腸炎の増悪や体重減少が見られた。この所見は、HBZがIL-10欠損による自己免疫性腸炎を増強することが示唆され、仮説とは異なる機序を検討する必要があると考えらえた。細胞質内・核内におけるHBZ結合タンパク質の網羅的探索を行うため、ビオチンリガーゼ-HBZ融合タンパク質を発現するプラスミドを作成し、ビオチンリガーゼ付加HBZの安定発現細胞株を樹立した。また、Yeast two hybrid法によるスクリーニングにおいて同定されたJDP2について、免疫沈降においてHBZとJDP2が結合していることを確認した。更にJDP2についてはHBZトランスジェニックマウスやATLの症例においても発現が亢進していることを見出した。

为了研究IL-10信号通路在表达HBZ的细胞中的影响，HBz转基因（HBZ-TG）小鼠和IL-10敲除（IL-10 KO）小鼠的效果被配对以观察表型。最初，我们认为将IL-10 KO小鼠与HBZ-TG小鼠穿越IL-10 KO小鼠会抑制HBZ-TG小鼠的炎症，但实际上，观察到肠炎和体重减轻的加剧。这一发现表明，HBZ增强了由IL-10缺乏引起的自身免疫性肠炎，并表明应检查与假设不同的机制。为了全面搜索细胞质和细胞核中的HBz结合蛋白，创建了表达生物素连接酶-HBz融合蛋白的质粒，并建立了生物素连接酶添加的HBz的稳定表达。此外，已经证实，使用酵母两种混合方法在JDP2筛选中鉴定的JDP2的HBZ和JDP2通过免疫沉淀结合。此外，发现在HBz转基因小鼠和ATL的情况下，JDP2的表达增加。