多発性骨髄腫での治療効果予測バイオマーカー探索：血清cfDNAの経時的解析

寻找生物标志物来预测多发性骨髓瘤的治疗效果：血清 cfDNA 的时程分析

基本信息

批准号：
22K16293
负责人：
立田卓登
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Hirosaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16293/
关键词：
多発性骨髄腫 cfDNA レナリドミド

项目摘要

本研究は多発性骨髄腫での治療効果予測バイオマーカー探索のため、血清cell free DNA(cfDNA)に着目してその有用性を検討するものである。本年度は新型コロナウイルス感染症による入院制限、移動・活動制限の影響もあり、新規の臨床検体保存が予定通り進まなかった。そのため、主に既存のシークエンスデータの解析やこれまで特定されたバイオマーカー候補の遺伝子の機能解析の準備、予備データ作成を主に行った。これまでの我々の多発性骨髄腫症例の骨髄検体、cfDNAの解析ではLd療法中に特定の遺伝子変異(KRAS、RB1、CYLDなど)が新規に出現することを見出しており、これらの遺伝子が治療抵抗性に関与していることが示唆され、cfDNAでもこれらの変異を捉えることが可能であった。バイオマーカーとしての有用性が期待できるものの症例ごとに疾患背景、治療背景が異なるため、染色体異常や前治療別に解析する必要があり、対象症例を増やしながら更なる検討を進めていく。またこれらのバイオマーカー候補遺伝子の変異の有無や蛋白発現量の違いによる各種治療に対する反応性、耐性機序の解明のため、細胞株を用いた機能解析、既存臨床検体を用いた骨髄クロット標本の免疫染色などの準備を行っている。機能解析では特定の遺伝子のノックアウトの後、レナリドミドやデキサメサゾンなどの治療薬を加えることで細胞生存にどのような影響を与えるか、MTSアッセイやアポトーシスアッセイ（アネキシンV、7-AAD）を用いて検証する予定である。

这项研究的重点是无血清细胞DNA（CFDNA）来检查其有用性，通过专注于无血清细胞DNA（CFDNA）来寻找多发性骨髓瘤的治疗效果。今年，由于新结肠病毒感染引起的住院，活动和活动限制的限制，因此未按计划进行新的临床样本。因此，我们主要分析了现有的序列数据，准备迄今为止生物标志物候选者基因的功能分析，并创建备用数据。 CFDNA的分析是我们多个骨胶质瘤病例的骨髓样品，发现在LD治疗期间，特定的基因品种（KRAS，RB1，Cylld等）出现，并且这些基因涉及它。在抗性中，CFDNA可以捕获这些突变。尽管可以预期生物标志物的有用性，但每种情况下的疾病背景和治疗背景都是不同的，因此有必要通过染色体异常和预处理进行分析，并在增加目标病例的同时进行进一步的检查。此外，为了阐明由于目前蛋白质的差异而引起的蛋白质量的差异，这些生物标志物候选候选候选候选候选候选人和骨髓泥clot，这是由于生成的蛋白质量差异而引起的各种处理的反应性和抗性机制使用现有的临床样品的标本。在功能分析中，在敲除特定基因后，如何通过添加Lenalidomide或Dexame Saizon等处理来添加细胞存活，使用MTS分析和Apotoshissey（Annexin V，7-AAD）进行验证。