皮膚移植片対宿主病におけるレジデントメモリーT細胞の病態進展・維持機構の解明

阐明植皮抗宿主病中常驻记忆T细胞的病理发展和维持机制

• 批准号: 22K16276
• 负责人: 久保田 典子
• 金额: $ 3万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16276/
• 关键词: レジデントメモリーT細胞; メモリーT細胞; 移植片対宿主病; 自己免疫疾患; CD8T細胞

申請者は昨年度、皮膚移植片対宿主病（GVHD）において、角化細胞を標的とするメモリーT細胞が、皮膚組織中にてレジデントメモリーT細胞（TRM）として留まるのか、またTRMが皮膚GVHDの慢性化や増悪に関与するのかを解明する研究を行った。まず、GVHD様自己免疫性皮膚粘膜疾患誘導モデルマウスにおける、皮膚でのTRMの動態を解析した。keratin 14 promoter-membrane ovalbumin transgenic（K14-mOVA Tg）マウスにGFPが組み込まれたOVA特異的CD8 T細胞(OT-I細胞)を移入しGVHD様皮膚症状を惹起させ、FACSにて経時的にマウス耳介皮膚組織中のOT-I細胞を解析したところ、OT-I細胞数は移入後8日目に最大になるが、その後も一部は皮膚に残ることが分かった。さらに、皮膚に残ったOT-I細胞の多くがTRMに分化し、CD122を発現していることが分かった。このCD122はCD132と二量体を形成し、IL-15の受容体としてメモリーT細胞の生存と維持に関与していることが知られており、主にメモリーT細胞上に発現している。そこで次に、K14-mOVA Tgマウスに抗CD122抗体を投与し、皮膚GVHDの進展が抑制されるか否かを解析した。K14-mOVA TgマウスにOT-I細胞を移入し、皮膚にOT-I由来のTRMが増加し始める移入後7日目より抗CD122抗体を投与したところ、急性GVHD様の皮膚粘膜症状は軽快し、続いて起こる慢性GVHD様の線維化も抑制された。耳介皮膚組織中のOT-ITRMのFACS解析では、急性/慢性GVHD様皮膚粘膜症状を発症する移入後14日目と28日目において、いずれも抗CD122抗体を投与することでOT-ITRM数が減少していることが確認できた。

去年，申请人研究了在皮肤移植物抗宿主病（GVHD）中，靶向角质形成细胞的记忆T细胞是否仍作为皮肤组织中的常驻记忆T细胞（TRM），以及TRM是否会导致皮肤GVHD。确定它是否涉及慢性或恶化。首先，我们分析了 GVHD 样自身免疫性皮肤粘膜疾病诱发的小鼠模型皮肤中 TRM 的动态。将含有 GFP 的 OVA 特异性 CD8 T 细胞（OT-I 细胞）转移至角蛋白 14 启动子膜卵清蛋白转基因 (K14-mOVA Tg) 小鼠中，以诱导 GVHD 样皮肤症状，并使用 FACS 分析随时间变化对小鼠进行分析。对耳廓皮肤组织中的 OT-I 细胞进行分析显示，移植后第 8 天，OT-I 细胞的数量达到最大值，但即使之后仍有一些细胞残留在皮肤中。此外，发现皮肤中残留的许多OT-I细胞分化为TRM并表达CD122。这种CD122与CD132形成二聚体，已知作为IL-15的受体参与记忆T细胞的存活和维持，并且主要在记忆T细胞上表达。因此，我们接下来给K14-mOVA Tg小鼠施用抗CD122抗体，并分析皮肤GVHD的进展是否受到抑制。当OT-I细胞被转移到K14-mOVA Tg小鼠并从转移后第7天开始施用抗CD122抗体时，当OT-I衍生的TRM开始在皮肤中增加时，急性GVHD样粘膜皮肤症状得到缓解。随后的慢性 GVHD 样纤维化也受到抑制。对耳廓皮肤组织中 OT-ITRM 的 FACS 分析表明，在移植后第 14 天和 28 天，施用抗 CD122 抗体减少了 OT-ITRM 的数量，此时急性/慢性 GVHD 样粘膜皮肤症状的出现得到证实。