SLE皮疹におけるオートファジー/LAPバランスを標的とした新規治療法の開発

开发针对 SLE 皮疹中自噬/LAP 平衡的新疗法

基本信息

批准号：
22K16265
负责人：
冬野洋子
金额：
$ 3万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16265/
关键词：
SLE皮疹 AHR Rubicon SLE LAP オートファジー

项目摘要

本年度は、ヒト表皮細胞（NHEK）を用いて、オートファジーとLAP（LC3関連貪食作用）のバランス不均衡を利用したin vitroのSLE皮疹モデルを作製し、オートファジーとLAPのバランス制御におけるAHRの役割を解明することを目的とし、研究を行った。SLE患者および正常コントロール患者の生検皮膚組織の免疫染色で検討を行った。患者表皮におけるAHRの活性動態については、コントロール群と比較して、AHRの活性化のマーカーであるCYP1A1の発現は有意に減少していた。また、抗酸化酵素NRF2の発現が減少傾向にあり、酸化ストレスが上昇している可能性が考えられた。患者表皮におけるオートファジー/LAPバランスについては、ATG5の発現が患者群の表皮で有意に上昇しており、LAP特異的な分子であるオートファジー抑制因子のRubiconの発現は有意に減少していた。以上よりヒトSLE皮疹の表皮では、Rubiconの発現が低下しオートファジーが亢進し、AHRの活性化が減少していることが明らかとなった。死細胞シグナルについては、caspase7,8発現が、患者群の表皮で有意に上昇しており、死細胞のシグナルは上昇していた。SLE皮疹にはIFNαが重要であることが知られているが、IFNα関連ケモカインであるCXCL10は患者群の表皮で増加傾向を示した。LAP/オートファジーバランス不均衡を利用したin vitroのSLE皮膚モデルとして、RubiconをノックダウンしたNHEKにUVを照射したところ、マイクロアレイでSi control＋UV照射群と比較して、SLEの重症度と相関するIRF5の有意な上昇を認めた。RubiconをノックダウンしたNHEKにIFNαの刺激を加えたところ、IFNκ, IFNλ、CXCL9,10は上昇傾向を認めた。

今年，我们使用人表皮细胞（NHEK）创建了一个体外SLE喷发模型，该模型利用了自噬和LAP（与LC3相关的吞噬作用）之间的平衡失衡，并进行了一项研究，目的是阐明AHR在自动噬菌体和lap的平衡控制中的作用。通过对SLE患者的免疫染色和正常对照患者进行免疫染色，检查了活检皮肤组织。关于AHR在患者表皮中的活性动力学，与对照组相比，CYP1A1的表达是AHR激活的标志物的表达显着降低。此外，抗氧化剂酶NRF2的表达处于下降趋势，氧化应激可能会升高。关于患者表皮的自噬/膝盖平衡，患者组表皮的ATG5表达显着增加，并且一种自噬抑制剂Rubicon的表达显着降低。从上面可以看出，rubicon的表达降低，自噬增加，并且在人类SLE皮疹表皮中降低了AHR激活。关于死细胞信号，患者组的表皮显着增加了CASPASE7,8的表达，并且死细胞信号升高。尽管已知IFNα对于SLE皮疹很重要，但与IFNα相关的趋化因子CXCL10显示出患者组表皮的趋势增加。作为一种利用膝/自噬平衡失衡的体外SLE皮肤模型，当Rubicon被击倒NHEK时，NHEK被辐照到紫外线时，IRF5显着增加，与SI Control + UV辐照组相比，IRF5的严重程度与SLE的严重程度相关。当将IFNα刺激到NHEK时，NHEK击倒了Rubicon，IFNκ，IFNλ和CXCL9,10显示出向上的趋势。