尿細管特異的Nrf2欠損による腎間質線維化増強作用に関する研究

肾小管特异性Nrf2缺乏促进肾间质纤维化的研究

基本信息

批准号：
22K16249
负责人：
菱田英里華
金额：
$ 1.75万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16249/
关键词：
腎臓内科学 Nrf2/Keap1 腎間質線維化尿細管腎血管内皮 Nrf2 線維化血管内皮

项目摘要

野生型マウス (WT; C57BL/6)を用いて片側尿細管結紮 (UUO)モデルを作製し、Nrf2活性化薬の間質線維化への影響を解析した。WTのUUOモデルに CDDO-Meの経口投与を行うと、生存マウスでは腎間質線維化が抑制されたが、被験マウスの約7割が死亡した。CDOO-im腹腔内投与(ip)はマウスの生存率を下げずにSirius red染色で評価した間質線維化領域を減少し、Nrf2下流遺伝子であるNqo1・Gtsm1の発現を亢進し、線維化マーカーのmRNA発現を抑制した。次にMicroarrayを用いて間質線維化に関与する因子を検索したが、CDDO-Me投与群と非投与群において発現に有意差がみられた因子は同定できなかった。次に尿細管特異的Nrf2欠損(Nrf2f/f; Pax-8cre/-)および血管内皮特異的Nrf2欠損(Nrf2f/f; Tie2cre/-)を用いてUUOモデルを作製し、腎間質線維化への影響を解析した。Nrf2f/f; Pax-8cre/-はWTと比較しUUOモデルにおいて正常尿細管面積を減少したが、Sirius Red染色で評価した間質線維化領域や線維化mRNAマーカーの発現上昇は見られなかった。Nrf2f/f; Tie2cre/-は尿細管や間質線維化の程度に影響を及ぼさなかった。次にNrf2f/f; Pax-8cre/-およびNrf2f/f; Tie2cre/-マウスにアデニン腎症モデルを作製し、腎間質線維化への影響を解析した。アデニン食餌day 21においてNrf2f/fと比較しNrf2f/f; Pax8cre/+群で正常尿細管の面積が減少し、間質線維化の面積と線維化mRNAマーカーが増加した。Nrf2f/f; Tie2cre/+群では変化がみられなかった。以上より、腎間質線維化において尿細管Nrf2が重要な役割を担う可能性が示唆された。

我们使用野生型小鼠 (WT; C57BL/6) 创建了单侧肾小管结扎 (UUO) 模型，并分析了 Nrf2 激活剂对间质纤维化的影响。向 WT UUO 模型口服 CDDO-Me 可抑制存活小鼠的肾间质纤维化，但大约 70% 的测试小鼠死亡。腹腔内给予（ip）CDOO-im可减少天狼星红染色评估的间质纤维化面积，而不降低小鼠的存活率，增加Nrf2下游基因Nqo1和Gtsm1的表达，并增加纤维化标志物的表达。 mRNA 表达受到抑制。接下来，我们使用微阵列来寻找与间质纤维化有关的因子，但我们无法识别任何在CDDO-Me治疗组和未治疗组之间表达存在显着差异的因子。接下来，我们利用肾小管特异性Nrf2缺陷（Nrf2f/f；Pax-8cre/-）和血管内皮特异性Nrf2缺陷（Nrf2f/f；Tie2cre/-）创建了UUO模型，并开发了肾间质纤维化模型我们分析了影响。与 WT 相比，Nrf2f/f；Pax-8cre/- 减少了 UUO 模型中的正常肾小管面积，但通过天狼星红染色评估，未观察到间质纤维化面积或纤维化 mRNA 标记物表达的增加。 Nrf2f/f；Tie2cre/-对肾小管或间质纤维化程度没有影响。接下来，在Nrf2f/f；Pax-8cre/-和Nrf2f/f；Tie2cre/-小鼠中建立腺嘌呤肾病模型，并分析对肾间质纤维化的影响。腺嘌呤饮食第21天，与Nrf2f/f组相比，Nrf2f/f组正常肾小管面积减少，间质纤维化面积和纤维化mRNA标记物增加； Nrf2f/f 组没有观察到变化；Tie2cre/+ 组没有观察到变化。这些结果表明肾小管Nrf2可能在肾间质纤维化中发挥重要作用。