転写因子MondoによるPodocyte代謝調整機構の解明

转录因子Mondo阐明足细胞代谢调节机制

• 批准号: 22K16240
• 负责人: 酒井 晋介
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16240/
• 关键词: オートファジー; 解糖系; 老化; 脂質代謝; ミトコンドリア

Podocin-Cre(Podocyte特異的にCreを発現するマウス)とMondoA floxマウスを交配させ、Podocyte特異的MondoA不全マウス(KOマウス)を作成した。KOマウスを２か月齢および6か月齢まで飼育したところ、KOマウスにおいて6か月齢では体重変化がみられたが、尿蛋白や尿糖などの尿所見はみられなかった。また腎組織の染色を施行したが、KOマウスに糸球体硬化などの特異的に糸球体病変は認めなかった。そこで、高脂肪食負荷2型糖尿病モデルを作成し、疾患モデルへの影響を確認したが、6か月までの飼育では、Wild typeと比較して尿蛋白に変化はみられず、組織変化も有意な糸球体硬化の所見はみられなかった。次に、野生型マウスおよびKOマウスより単離糸球体を回収し、WBによるLC3などのAutophagy因子の評価を行った。尿細管ではMondoAの低下によりAutophagy活性の低下がみられたが、Podocyteにおいては大きな変化はみられなかった。一方で、仮説通り解糖系因子の亢進はみられ、これらは、疾患モデルにおいても同様であった。電子顕微鏡でのポドサイトの評価を行ったが、ミトコンドリアやリソソーム形態に大きな変化がみられず、PodocyteにおいてはMondoAが明らかなAutophagy　Regulatorとは言い難い結果であった。一方で、同じ腎組織である近位尿細管細胞におけるMondoAはAutophagy活性を制御し、虚血再灌流や飢餓状態においてMondoAの低下によりAutophagyが停滞することを明らかにした。近位尿細管のMondoAの低下により脂質の蓄積が低下することも明らかになり、解糖系に依存してエネルギー代謝を行っていることが判明した。以上の結果は、もともとPodocyteは解糖系を中心にエネルギー代謝を行っていることから、近位尿細管と比較してMondoAの有無によるPhenotypeの変化を起こしにくいことが想定された。

Podocin-cre（特定表达CRE的小鼠）和Mondoa Flox小鼠被交叉以创建Podocyte特异性的Mondoa失败小鼠（KO小鼠）。当KO小鼠被繁殖到2个月和六个月的年龄时，KO小鼠在六个月时的体重变化，但没有发现尿液蛋白或尿糖等尿液。另外，进行了肾脏组织的染色，但没有肾小球病变（例如KO小鼠肾小球硬化）的特异性。因此，我们创建了一个高脂肪的饮食负载2型糖尿病模型，并确认了对疾病模型的影响，但是在长达六个月的繁殖中，与野生类型相比，尿蛋白没有变化。肾小球硬化的发现。接下来，从野生小鼠和KO小鼠中收集分离的肾小体，并通过WB评估了自噬因素，例如LC3。在尿管中，Mondoa的减少导致自噬活性的减少，但在足细胞中没有显着变化。另一方面，正如假设所表明的那样，乙醇酸因子增强了，这在疾病模型中是相同的。他评估了具有电子显微镜的POD位点，但线粒体或岩性形式没有显着变化，在足细胞中，很难说Mondoa是自噬调节剂。另一方面，在同一肾脏组织Mondoa中的Mondoa控制了自噬活动，表明自噬在缺血性振兴者和饥饿中蒙多亚的减少而停滞不前。很明显，脂质的积累由于俯卧的尿管减少而降低，并且发现能量代谢是通过依靠糖进行的。上述结果最初是假定足细胞主要在糖酵解系统中具有能量代谢，因此与近尿管相比，具有或没有Mondoa的表型的变化不可能变化。