抗菌物質であるリゾチーム・キトサン糖複合体の慢性緑膿菌気道感染への効果の解明

阐明溶菌酶-壳聚糖糖复合物（一种抗菌物质）对慢性铜绿假单胞菌呼吸道感染的作用

• 批准号: 22K16167
• 负责人: 島田 翔
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16167/
• 关键词: 慢性感染マウスモデル; 抗菌物質; 薬剤耐性菌; リゾチーム・キトサン糖複合体; 慢性緑膿菌感染症

慢性緑膿菌感染モデルの確立および薬剤の投与スケジュールの条件検討についてアガロースビーズを用いて緑膿菌を気道内に投与するモデルを検討していた。ビーズ作成時の条件検討を通じて、感染回復期でも緑膿菌が肺内で10の3乗から10の４乗検出されるマウスモデルが確立できた。複数回の実験を通して、同様の結果が得られており、薬剤投与試験を検証するためのモデルができたと考えている。並行して、リゾチーム・キトサン複合体（LYZOX）の毒性試験も実施した。マウス内にマイクロ噴霧器を用いてLYZOXを隔日投与する実験を行い、体重推移や肺の病理標本を用いて、LYZOXの肺への毒性を評価した。LYZOX投与を1mg/dlの濃度で隔日3回投与しても体重増加はコントロール群(リン酸緩衝液投与群）と比較して有意な違いは認めず、肺の組織所見においても明らかな炎症細胞浸潤所見などの変化は認められなかった。以上より緑膿菌感染モデルの確立および、LYZOX気管内投与による毒性評価、投与スケジュールの調整は概ね完了できており感染モデルへのLYZOX投与実験を開始している。in vitroの検証では微量液体希釈法を用いた菌の発育抑制効果の検証を始めている。臨床検体から分離される薬剤耐性株はまだ集まっていないが、まずは標準株を用いて薬剤併用効果について検証していく予定である。現在までのところ、LYZOXのロットの変更に伴う最低発育阻止濃度の変化が確認されており、新しいLYZOXのロット単剤による抗菌効果の再評価を進めている。

关于慢性铜绿假单胞菌感染模型的建立和给药方案条件的检查，我们正在研究使用琼脂糖珠将铜绿假单胞菌注入呼吸道的模型。通过考虑珠生产过程中的条件，我们能够建立一种小鼠模型，其中即使在感染恢复期，从10 3 到10 4 也可以在肺部检测到铜绿假单胞菌。通过多次实验获得了类似的结果，我们相信我们已经创建了一个验证给药测试的模型。同时，还进行了溶菌酶-壳聚糖复合物（LYZOX）的毒性测试。我们进行了一项实验，其中使用微雾化器每隔一天给小鼠注射LYZOX，并通过体重变化和肺部病理标本评估LYZOX对肺部的毒性。即使隔天3次以1 mg/dl的浓度给予LYZOX，与对照组（磷酸盐缓冲液给药组）相比，体重增加也没有显着差异，并且在组织学结果中清楚地观察到炎症细胞。未观察到肺部变化，例如浸润情况。如上所述，铜绿假单胞菌感染模型的建立、LYZOX气管内给药的毒性评价以及给药方案的调整已经基本完成，我们已经开始对感染模型进行LYZOX给药的实验。体外验证已开始验证采用微量稀释法抑制细菌生长的效果。尽管尚未收集到从临床标本中分离出的耐药菌株，但我们计划首先使用标准菌株验证药物组合的有效性。迄今为止，由于 LYZOX 批次的变化而导致的最低抑菌浓度的变化已得到证实，我们正在重新评估新 LYZOX 批次中单药的抗菌功效。