新規長鎖ノンコーディングRNAを介した動脈硬化発症機序の解明

新型长链非编码RNA介导的动脉粥样硬化发病机制的阐明

基本信息

批准号：
22K16107
负责人：
呉家賢
金额：
$ 3万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16107/
关键词：
動脈硬化長鎖ノンコーディングRNA 内皮細胞

项目摘要

本研究では、新たに発見した長鎖ノンコーディングRNA(LncX)の発現抑制による内皮健常性の維持効果を、生体外の実験にて確認した。しかし、生体内での保護効果や分子的なメカニズムについてはまだ解明されていなかった。そこで今回、CRISPR-Cas9技術を用いてLncXノックアウトマウス(LncX-KO)を作製し、動脈硬化モデルであるApoE欠損マウス(ApoE-KO)と交配して、ApoE欠損マウス背景下のLncXヘテロ欠損マウス(ApoE-KO/LncX-HE)を作製した。 LncXヘテロ欠損マウスにおいて、高脂肪食の負荷下で大動脈全体に形成される脂肪プラークの面積が、コントロールマウス(ApoE-KO/LncX-WT)と比べて減少する傾向が確認された。また、培養内皮細胞を用いて、LncXノックダウンによる遺伝子発現変化を解析した。その結果、DNA複製や細胞分裂に関わる遺伝子群の発現量が減少し、一方でエンドサイトーシスや細胞間接着に関わる遺伝子の発現量が上昇することが明らかになった。さらに、フローサイトメトリーを用いて、LncXノックダウンによる細胞周期の休止も確認した。これらの成果から、LncXによる細胞周期制御を介した新たな動脈硬化抑制メカニズムが示唆された。

在本研究中，我们通过体外实验证实了抑制新发现的长链非编码RNA（LncX）的表达对维持内皮健康的作用。然而，其体内保护作用和分子机制尚未阐明。因此，我们利用CRISPR-Cas9技术创建了LncX基因敲除小鼠（LncX-KO），并将其与ApoE缺陷小鼠（ApoE-KO）杂交，产生了动脉硬化模型（ApoE-KO/LncX-HE）。证实在LncX杂合子小鼠中，与对照小鼠（ApoE-KO/LncX-WT）相比，高脂肪饮食下整个主动脉形成的脂肪斑块面积减少。我们还使用培养的内皮细胞分析了 LncX 敲低引起的基因表达变化。结果显示，参与DNA复制和细胞分裂的基因表达水平下降，而参与胞吞作用和细胞间粘附的基因表达水平增加。此外，使用流式细胞术，我们证实了 LncX 敲低导致的细胞周期停滞。这些结果表明 LncX 细胞周期控制介导了一种新的抗动脉硬化机制。

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Activation of cholinergic anti-inflammatory pathway attenuates monocyte-endothelial adhesion through FUT7 inhibition

胆碱能抗炎通路的激活通过抑制 FUT7 减弱单核细胞内皮粘附

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
呉家賢;井上剛
通讯作者：
井上剛

Induction of tetraspanin 13 contributes to the synergistic anti-inflammatory effects of parasympathetic and sympathetic stimulation in macrophages

DOI：
10.1016/j.bbrc.2023.04.118
发表时间：
2023-05-08
期刊：
BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
影响因子：
3.1
作者：
Umene，Ryusuke;Nakamura，Yasuna;Inoue，Tsuyoshi
通讯作者：
Inoue，Tsuyoshi

Activation of α7 nicotinic acetylcholine receptors attenuates monocyte endothelial adhesion through FUT7 inhibition

α7 烟碱乙酰胆碱受体的激活通过抑制 FUT7 减弱单核细胞内皮粘附

DOI：
10.1016/j.bbrc.2021.12.094
发表时间：
2022
期刊：
Biochemical and Biophysical Research Communications
影响因子：
3.1
作者：
Wu Chia-Hsien;Inoue Tsuyoshi;Nakamura Yasuna;Uni Rie;Hasegawa Sho;Maekawa Hiroshi;Sugahara Mai;Wada Youichiro;Tanaka Tetsuhiro;Nangaku Masaomi;Inagi Reiko
通讯作者：
Inagi Reiko