シングルセルシーケンスを用いたB型慢性肝炎治癒に関わる新たな免疫機構の解明

利用单细胞测序阐明治疗慢性乙型肝炎的新免疫机制

基本信息

批准号：
22K16019
负责人：
西尾啓
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16019/
关键词：
B型慢性肝炎免疫 T細胞

项目摘要

世界には2.5億人のHBV持続感染患者が存在する。HBVは肝細胞内に侵入すると、HBV ゲノムである不完全環状二本鎖DNAが肝細胞内の核内に移行し、完全閉鎖二本鎖（cccDNA）に修復され、それを鋳型として、HBVの複製に必要な全てのウイルスmRNAが転写される。しかし、cccDNAはクロマチン様構造を呈した状態で核内に安定に存在するため、抗ウイルス治療によるcccDNAの排除は困難である。それゆえ、機能的治癒が現在の治療目標とされているが、核酸アナログ製剤やペグインターフェロン治療などの既存の治療法で機能的治癒が得られるのは、10％未満に限られている。それゆえ、B型慢性肝炎に対する合理的な治療戦略の確立のためにも、HBV感染時の免疫動態のさらなる理解が求められている。HBV感染時の獲得免疫応答は主にCD4+T細胞及びCD8+T細胞が関与している。CD8+T細胞はT細胞受容体を介して抗原ペプチド・MHC class I複合体を認識し、抗原ペプチドが提示されている感染細胞をアポトーシスに誘導し、感染細胞ごと破壊し、ウイルスを排除する。またIFN-a、TNF-a分泌により抗HBV効果を発揮する。一方、CD4+T細胞はMHC class II分子とHBV由来ペプチドの複合体を認識し、サイトカイン産生で直接ウイルス制御を行うとともに、抗原特異的CD8+T細胞の誘導を補助し、さらにB細胞による抗体産生にも関わる。本研究課題では、包括的にHBV特異的T細胞を検出し、シングルセルシーケンスにて解析する。HBs抗原高値患者とHBs抗原低値もしくは陰性化患者の血中HBV特異的T細胞を比較検討し、HBs抗原の陰性化に関わるHBV特異的T細胞のクラスターを同定する。さらに同定したクラスターの機能解析や、誘導機構について検討を通じて、B型慢性肝炎治癒に関わる新たな免疫機構の解明を目指す。

世界上有2.5亿HBV感染的患者。当HBV侵入肝细胞时，HBV基因组（一种缺乏经验的两个链链DNA）转移到肝细胞内部的核，恢复到完全封闭的两个链条（CCCDNA）（CCCDNA），这是一个模具和所有病毒mRNA复制所需的要求。但是，由于CCCDNA在染色质结构的细胞核中是稳定的，因此很难通过抗病毒治疗消除CCCDNA。因此，功能性愈合是当前的治疗目标，但只有不到10％的现有治疗方法，例如核酸模拟制剂和PEG干扰素治疗，只能以不到10％的速度获得。因此，为了建立慢性丙型肝炎的合理治疗策略，需要进一步了解HBV感染过程中的免疫运动。 HBV感染时获得的免疫反应主要参与CD4+T细胞和CD8+T细胞。 CD8+T细胞通过T细胞受体识别抗原肽和MHC I类复合物，诱导由抗原肽提供的感染细胞可凋亡，破坏每个受感染的细胞并消除病毒。它还通过IFN-A和TNF-A的分泌具有抗HBV效应。另一方面，CD4+T细胞识别MHC II类分子和HBV衍生的肽的复合物，通过细胞因子直接控制病毒，有助于抗原特异性CD8+T细胞，并进一步参与B细胞。。在该研究主题中，用单细胞序列对HBV特异性T细胞进行了全面检测和分析。比较和检查HBS抗原患者与高HBS抗原或阴性患者，比较血液HBV特异性T细胞，并鉴定出涉及HBS抗原阴性的HBV特异性T细胞的簇。此外，通过检查簇的功能分析和指导机制，阐明与乙型肝炎有关的新免疫系统的目的。