腫瘍細胞由来エクソソームに内包するmicroRNAを対象とした体液生検法の開発

开发针对肿瘤细胞来源的外泌体中含有的microRNA的体液活检方法

基本信息

批准号：
22K15993
负责人：
川上智
金额：
$ 3万
依托单位：
University of Yamanashi
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

腫瘍細胞由来エクソソームに内包するmicroRNAを対象とした体液生検法の開発をテーマとする本研究において、まずは腫瘍由来の核酸濃度が高いと推定されるIPMN症例の膵液を対象として研究を行った。我々は以前、次世代シークエンサーを用いた切除組織の網羅的microRNAの解析により、悪性IPMNの候補マーカーとして膵液中のmiR-10a-5p がIPMN由来浸潤癌（INV）の鑑別に有用であることを報告した。今回、膵液中のmiR-10a-5pを測定することよりIPMNの悪性度を評価した。Low-grade dysplasia (LGD) 10例、High-grade dysplasia (HGD) 10例、INV 5例、IPMN併存膵癌 (PDAC) 5例、画像follow-up例 (Follow) 34例を対象とし、HGD, INV, PDACを悪性群、LGD, Followを良性群と定義した。膵液検体からエクソソームを抽出し、microRNAを分離した後リアルタイムPCRでmiR-10a-5pの発現を測定した。悪性IPMNに関わる因子の解析を行った結果、多変量解析ではHRS個数（OR 4.0, 95%CI 1.3-12.4, p=0.016）、miR-10a-5p高値（miR-high）（OR 4.4, 95%CI 1.0-18.6, p=0.043）、膵液細胞診陽性（OR 24.1, 95%CI 1.9-308.0, p=0.014）の3つが独立した因子として抽出された。HRS個数（0-3点）、miR-high（1点）、膵液細胞診陽性（1点）によるスコアを作成した場合、HRS個数と比較して有意に診断能の向上を認めた（AUROC 0.789 vs 0.669, p=0.019）。膵液エクソソーム内包miR-10a-5pは、悪性IPMNの鑑別に有用であると考えられた。

在这项研究的重点是开发肿瘤细胞衍生的外泌体中包含的microRNA的流体活检方法，我们首先对IPMN病例的胰汁进行了一项研究，据估计肿瘤源性核酸浓度较高。我们先前曾报道过，胰汁中的miR-10a-5p可用于通过使用下一代测序仪分析切除组织的全面microRNA来区分IPMN衍生的侵入性癌症（INV）。在本文中，我们通过测量胰汁中的miR-10a-5p来评估IPMN的恶性肿瘤。该研究包括10例低级发育不良（LGD），10例高级发育异常（HGD），5例INV病例，5例INV病例，胰腺癌合并症（PDAC）的合并症病例（PDAC）和34例图像随访病例（后续）（后面），以及34例HGD，Invac和PDAC的案例，均为不适式和lgd，并遵循了良好的固定和lgd。从胰果汁样品中提取外泌体，分离microRNA，并通过实时PCR测量miR-10a-5p的表达。 As a result of analyses of factors related to malignant IPMN, three independent factors were extracted in the multivariate analysis: the number of HRS (OR 4.0, 95%CI 1.3-12.4, p=0.016), high miR-10a-5p (miR-high) (OR 4.4, 95%CI 1.0-18.6, p=0.043), and positive pancreatic juice cytology (OR 24.1, 95％CI 1.9-308.0，p = 0.014）。当基于HR的数量（0-3点），miR-High（1分）和阳性胰果汁细胞学（1分）制备得分时，与HRS的数量相比，观察到明显提高的诊断能力（AUROC 0.789 vs 0.669 vs 0.669，p = 0.019）。胰果汁外泌体封装的miR-10a-5p被认为可用于区分恶性IPMN。