腫瘍細胞由来エクソソームに内包するmicroRNAを対象とした体液生検法の開発

开发针对肿瘤细胞来源的外泌体中含有的microRNA的体液活检方法

基本信息

批准号：
22K15993
负责人：
川上智
金额：
$ 3万
依托单位：
University of Yamanashi
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

腫瘍細胞由来エクソソームに内包するmicroRNAを対象とした体液生検法の開発をテーマとする本研究において、まずは腫瘍由来の核酸濃度が高いと推定されるIPMN症例の膵液を対象として研究を行った。我々は以前、次世代シークエンサーを用いた切除組織の網羅的microRNAの解析により、悪性IPMNの候補マーカーとして膵液中のmiR-10a-5p がIPMN由来浸潤癌（INV）の鑑別に有用であることを報告した。今回、膵液中のmiR-10a-5pを測定することよりIPMNの悪性度を評価した。Low-grade dysplasia (LGD) 10例、High-grade dysplasia (HGD) 10例、INV 5例、IPMN併存膵癌 (PDAC) 5例、画像follow-up例 (Follow) 34例を対象とし、HGD, INV, PDACを悪性群、LGD, Followを良性群と定義した。膵液検体からエクソソームを抽出し、microRNAを分離した後リアルタイムPCRでmiR-10a-5pの発現を測定した。悪性IPMNに関わる因子の解析を行った結果、多変量解析ではHRS個数（OR 4.0, 95%CI 1.3-12.4, p=0.016）、miR-10a-5p高値（miR-high）（OR 4.4, 95%CI 1.0-18.6, p=0.043）、膵液細胞診陽性（OR 24.1, 95%CI 1.9-308.0, p=0.014）の3つが独立した因子として抽出された。HRS個数（0-3点）、miR-high（1点）、膵液細胞診陽性（1点）によるスコアを作成した場合、HRS個数と比較して有意に診断能の向上を認めた（AUROC 0.789 vs 0.669, p=0.019）。膵液エクソソーム内包miR-10a-5pは、悪性IPMNの鑑別に有用であると考えられた。

在这项旨在开发一种针对肿瘤细胞源性外泌体中所含 microRNA 的体液活检方法的研究中，我们首先对 IPMN 病例的胰液进行了研究，估计其中肿瘤源性核酸的浓度很高。我们之前报道称，胰液中的 miR-10a-5p 作为恶性 IPMN 的候选标记物，可通过使用下一代测序仪对切除组织进行全面的 microRNA 分析来区分 IPMN 衍生的侵袭性癌症（INV）。在本研究中，我们通过测量胰液中的 miR-10a-5p 来评估 IPMN 的恶性程度。研究对象包括10例低度不典型增生（LGD）、10例高度不典型增生（HGD）、5例INV、5例胰腺癌伴IPMN（PDAC）以及34例影像随访。，PDAC定义为恶性组，LGD，Follow定义为良性组。从胰液样本中提取外泌体并分离 microRNA 后，我们使用实时 PCR 测量了 miR-10a-5p 的表达。分析与恶性IPMN相关的因素，多变量分析显示，HRS（OR 4.0，95%CI 1.3-12.4，p=0.016）和miR-10a-5p高水平（miR-high）（OR 4.4）的数量, 95) %CI 1.0-18.6, p=0.043)，胰液细胞学阳性（OR 24.1， 95%CI 1.9-308.0, p=0.014) 被提取为独立因素。当根据HRS数量（0-3分）、miR-high（1分）和胰液细胞学阳性（1分）创建评分时，与HRS数量相比，诊断能力显着提高（AUROC 0.789） vs 0.669，p=0.019）。胰液外泌体封装的 miR-10a-5p 被认为有助于区分恶性 IPMN。