遺伝子発現制御法を用いた多発性硬化症の成因解明と治療探索研究

利用基因表达控制方法阐明多发性硬化症的病因和治疗探索

基本信息

批准号：
22K15669
负责人：
中里祐毅
金额：
$ 2.91万
依托单位：
University of Miyazaki
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

これまで多発性硬化症モデル(Experimental autoimmune encephalomyelitis)マウスに対する生理活性ペプチドグレリンが神経障害に対して抑制的に作用することが明らかにされている(Theil MM et al. J Immunol 2009)。我々は、EAEに対するグレリン受容体選択的作動薬であるアナモレリンの治療効果およびその作用メカニズムについて研究を進行中である。EAEマウス（雄）にアナモレリンを連日腹腔内投与すると、運動障害は改善した。ヘマトキシリンエオシン染色で炎症巣は軽減し、抗MBP抗体による免疫染色で脱髄は抑制された。フローサイトメトリーでは脊髄内へのリンパ球の浸潤は減少傾向を示し、特に抗CD4抗体による免疫染色により、CD4陽性細胞の中枢神経浸潤が抑制されることがわかった。In vitro実験系としてEAEマウスの脾臓から採取したCD4陽性細胞にアナモレリンを直接添加したところ、炎症性サイトカインの遺伝子発現(TNFa、IFNg、IL-17 mRNA)はいずれも減少し、神経保護因子の遺伝子発現は変化がなかった。またグレリン受容体欠損マウスにEAEを誘導すると、アナモレリンによる神経障害抑制作用はみられなくなった。これらのことから、アナモレリンは多発性硬化症病態に対して抗炎症的に作用し、組織障害を軽減することで神経障害を軽減を示すこと、またその作用はグレリン受容体を介していることが示唆された。アナモレリンによる神経障害軽減効果は雌マウスでの実験でも認められた。

So far, it has been shown that the bioactive peptide ghrelin in mice (Experimental autoimmune encephalomyelitis) inhibits the effect of neuropathy in neuropathy (Theil MM et al. J Immunol 2009).我们目前正在研究Anamorelin的治疗功效和作用机理，Anamorelin是EAE上的生长素蛋白受体选择性激动剂。腹膜内给予Anamorelin to eae小鼠（雄性）改善了运动障碍。苏木精元染色降低了炎症灶，并用抗MBP抗体抑制了脱髓鞘。 Flow cytometry showed a decline in lymphocyte infiltration into the spinal cord, and immunostaining with anti-CD4 antibodies in particular suppressed central nervous system invasion of CD4-positive cells. When anamorelin was directly added to CD4-positive cells collected from the spleens of EAE mice as an in vitro experiment, both of the gene expression of inflammatory cytokines (TNFa, IFNg, IL-17 mRNA) were reduced, and the gene expression of neuroprotective factors was not altered.此外，当在缺乏生长素受体的小鼠中诱导EAE时，不再观察到Anamorelin对神经病的抑制作用。 These results suggest that anamorelin acts anti-inflammatoryly against multiple sclerosis pathology, and that it reduces neurological damage by reducing tissue disorders, and that its effect is mediated through ghrelin receptors.在雌性小鼠的实验中，还观察到了原核素还原神经病的作用。