MUC1修飾糖鎖における構造解析と唾液腺腫瘍の診断マーカーとしての役割

MUC1修饰糖链的结构分析及其作为唾液腺肿瘤诊断标志物的作用

• 批准号: 22K15591
• 负责人: 杉浦 貴則
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15591/
• 关键词: 粘表皮癌; 糖鎖; ムチン; 電池泳動; 分子マトリックス電気泳動; 唾液腺腫瘍; バイオマーカー

東京歯科大学市川総合病院歯科・口腔外科及び口腔がんセンターにて切除した粘表皮癌3例と正常唾液腺7例を対象とした。構造解析は，凍結組織よりムチンを抽出し，分子マトリックス電気泳動（SMME）により分離，各種レクチンによるレクチンブロットにて泳動膜の染色を行った。また，局在解析は粘表皮癌3例のホルマリン固定パラフィン包埋切片を用いて腫瘍組織と周囲の正常唾液腺組織とを比較した。そして免疫組織化学染色（IHC）によるMUC1，sialyl TnおよびIn situ hybridization（ISH）によるC2GnT-1の発現を評価した。SMMEレクチンブロットでは，α2-3シアル酸認識レクチン(MAL-II)にて粘表皮癌全例のムチンバンドが染色された。一方，正常唾液腺ではシアル酸認識レクチンにおいても染色されるムチンバンドはないことが確認された。IHCの結果では，粘表皮癌全例において腫瘍組織内にMUC1の陽性を認めた。さらにC2GnT-1のISHにおいても粘表皮癌全例において陽性を認めた。また，粘表皮癌のC2GnT-1陽性部とMUC1陽性部は一致しており，粘表皮癌由来のMUC1がC2GnT-1によりコア2 O-型糖鎖による修飾をうけていることが示唆された。これに対し，粘表皮癌周囲の正常唾液腺組織ではMUC1は導管での2/3例に陽性であり，C2GnT-1のISHでは導管，粘液産生細胞，漿液産生細胞ともに陰性であった。以上より，α2-3シアル酸を含むコア2 O-型糖鎖に修飾されたMUC1は粘表皮癌の粘液産生細胞および非粘液産生細胞に発現されていることが示唆された。このことからこの糖鎖を有するMUC1は粘表皮癌の新たな診断における候補マーカーになり得る可能性が示唆された。

在东京牙科大学Ichikawa综合医院的牙科，口腔外科和口腔癌中心，切除了三例粘膜皮肤癌和7例正常唾液腺。为了进行结构分析，从冷冻组织中提取粘蛋白，通过分子基质电泳（SMME）分离，并通过用各种凝集素凝集凝集素印迹来染色运动膜。此外，使用福尔马林固定的石蜡包裹的切片进行了定位分析，该切片的三个病例的粘膜皮肤癌与周围的正常唾液腺组织比较肿瘤组织。然后通过MUC1，siAllyl TN和原位杂交（ISH）评估通过免疫组织化学染色（IHC）通过免疫组织化学染色（IHC）的表达。在SMME凝集素印迹中，用α2-3唾液酸识别凝集素（MAL-II）染色的所有粘液皮肤癌中的粘蛋白带均染色。另一方面，已经证实，在正常唾液腺中染色的粘蛋白带在唾液酸识别凝集素中也染色。 IHC结果显示在所有粘膜皮肤癌中，肿瘤组织中的MUC1阳性。此外，所有粘膜皮肤癌的病例对C2GNT-1 ISH也呈阳性。此外，粘膜皮肤癌的C2GNT-1阳性和MUC1阳性区域重合，表明源自粘膜皮肤癌的MUC1通过C2GNT-1的Core 2 O型Glycans修饰。相比之下，在粘膜表皮癌的正常唾液腺组织中，MUC1在2/3病例中呈阳性，并且在C2GNT-1的ISH中，导管，产生粘液的细胞和产生浆液性细胞的MUC1均为阴性。以上表明，在粘液癌的粘液产生和非粘液产生的细胞中表达了含有α2-3唾液酸的核心2 O型聚糖的MUC1。这表明含有该聚糖的MUC1可能是新诊断粘膜癌的候选标记。