マンソン裂頭条虫由来分子による抑制性レセプターの探索とMAPK経路抑制機序の解明

利用曼氏梭菌分子寻找抑制性受体并阐明 MAPK 通路抑制机制

基本信息

批准号：
22K15451
负责人：
近藤陽子
金额：
$ 3万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

当研究室ではマンソン裂頭条虫のプレロセルコイド（幼虫）が分泌する免疫抑制因子に着目し、これまでに幼虫の分泌物（ES）がマウスマクロファージのLPS活性を抑制する事を明らかにし、ES中からマクロファージに対する免疫抑制作用を有する糖タンパク質（Plerocercoid-immunosuppressive factor : P-ISF）の精製に成功した。本研究では、精製したP-ISFを用いたP-ISFの樹状細胞への影響の解析およびP-ISFのマクロファージにおける相互作用因子の探索を予定していたが、P-ISFの精製に使用していたレクチンカラムの製造中止により、P-ISFの供給法の変更を余儀なくされた。複数のタンパク質合成系を用いて組換えタンパク質の作製を試みたが、生理活性のあるP-ISF組換えタンパク質は合成できず、P-ISFの新たな精製法を確立することにした。新たな精製法を模索する過程において、ES中に細胞外小胞（EVs）を発見し、EVsがマウスマクロファージにおいてLPS刺激による一酸化窒素の産生や炎症性サイトカインの発現に対する抑制作用を持つことが明らかになった。また、免疫抑制作用が明らかになっているP-ISFはES中のEVsではない画分に検出されたため、EVsの免疫抑制作用はP-ISFとは異なる独立した作用であり、ES中の新たな免疫抑制因子の同定に成功した。さらに、この責任因子を探索し、EVs中に含まれるmicro RNAが一部を担っている可能性を見出した。

本实验室主要研究曼氏带绦虫的多尾蚴（幼虫）分泌的免疫抑制因子，目前已发现幼虫分泌物（ES）可抑制小鼠巨噬细胞的LPS活性，并成功纯化出一种糖蛋白（多尾蚴免疫抑制因子：P）。 -ISF）对巨噬细胞具有免疫抑制作用。在本研究中，我们计划使用纯化的P-ISF来分析P-ISF对树突状细胞的影响，并寻找P-ISF在巨噬细胞中的相互作用因子，由于凝集素柱的停止生产，我们被迫。改变P-ISF的供给方式。尽管我们尝试使用多种蛋白质合成系统生产重组蛋白，但我们无法合成具有生理活性的P-ISF重组蛋白，因此我们决定建立一种纯化P-ISF的新方法。在寻找新的纯化方法的过程中，我们在ES中发现了细胞外囊泡（EV），并发现EV对LPS刺激的小鼠巨噬细胞中一氧化氮的产生和炎症细胞因子的表达具有抑制作用。另外，在ES中除EV以外的部分中也检测到了已被证明具有免疫抑制作用的P-ISF，因此我们成功地鉴定了EV的免疫抑制作用是与P-ISF不同的独立作用。一个主要的免疫抑制因素。此外，我们寻找了相关因素，发现 EV 中含有的 micro RNA 可能是部分原因。

项目成果

期刊论文数量（3）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

マンソン裂頭条虫プレロセルコイドにおける細胞外小胞のマクロファージに与える影響

曼氏绦虫细胞外囊泡对巨噬细胞的影响

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
谷口莉楓;近藤陽子;伊藤大輔;蓼本早百合;大槻均
通讯作者：
大槻均

Extracellular vesicles derived from Spirometra erinaceieuropaei plerocercoids inhibit activation of murine macrophage RAW264.7 cells

猴头螺旋体来源的细胞外囊泡抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞的活化

DOI：
10.1016/j.parint.2023.102742
发表时间：
2023
期刊：
Parasitology International
影响因子：
1.9
作者：
Kondo Yoko;Ito Daisuke;Taniguchi Rika;Tademoto Sayuri;Horie Takashi;Otsuki Hitoshi
通讯作者：
Otsuki Hitoshi

マンソン裂頭条虫プレロセルコイド由来の細胞外小胞はマウスマクロファージ株RAW264.7の活性化を抑制する

源自曼氏绦虫的细胞外囊泡抑制小鼠巨噬细胞系 RAW264.7 的活化