車軸藻植物門ヒメミカヅキモから紐解くオーキシン生理機能の起源と進化

Hymemikadukimo 门揭示的生长素生理功能的起源和进化

• 批准号: 22K15179
• 负责人: 大高 きぬ香
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Japan Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15179/
• 关键词: 植物ホルモン; 車軸藻植物門; ホシミドロ目

本研究では、ヒメミカヅキモを実験モデルとして、祖先的なオーキシン生理機能に迫ることを目的とした。ヒメミカヅキモにおいては形質転換法が確立されているため、CRISPR／Cas9によって、既にいくつかのオーキシン関連遺伝子の変異株を得ていた。しかし、中には、遺伝子の変異の入り方が１パターンのみの変異株しかまだ得られていないケースがあった。遺伝子の変異の入り方が異なる変異株を複数株取得したかったため、形質転換の結果得られていた複数の薬剤耐性株から、さらにシーケンスによって遺伝子の変異の確認を進めた。その結果、遺伝子によっては、変異の入り方が同様の変異株が複数株見られたケースがあり、まだ全ての薬剤耐性株の変異を確認できているわけではないが、必要に応じてターゲットサイトを変更し、CRISPR／Cas9による形質転換を再度試みることについても検討する。同時に進めていた変異株の解析では、野生株と比較して異常な形態を示す細胞が見られたため、細胞の形態や生育スピード等について、より詳細に解析を進める。さらに植物ホルモンの量に影響がないかを調べるため、野生株とオーキシン関連遺伝子の変異株について、ホルモノーム解析を行った。サンプル量が少なかったせいか、以前は検出できたが今回は一部検出できなかった植物ホルモンがあるなどの問題点も見つかり、サンプルの準備方法を含めて再度検討したいと考えている。その後現在に至るまで産休・育休を取得中である。

在这项研究中，我们的目的是使用Simian Simian Simian Simian作为实验模型来仔细研究祖传生长素的生理学。在Himemikazukimo中已经建立了转化方法，CRISPR/CAS9已经获得了几种与生长素相关基因的突变体。但是，在某些情况下，只有一个突变菌株输入基因突变。因为我们想获得多种突变菌株，这些突变菌株在输入基因突变的方式上有所不同，所以我们通过从转化而获得的多种耐药菌株进行测序进一步证实了基因中的突变。结果，在某些情况下，有几个突变体的突变取决于基因，尽管尚未确认所有抗药性菌株中的突变，但我们还将考虑根据需要更改目标位点，并尝试再次使用CRISPR/Cas9转换。在同时进行的突变菌株的分析中，与野生菌株相比，细胞表现出异常的形态，并且将对细胞形态和生长速度进行更详细的分析。此外，对与生长素相关基因的野生菌株和突变菌株进行了formonome分析，以确定是否对植物激素水平有影响。也许由于样本的量很少，发现了问题，例如以前可能但无法检测到的植物激素，我们想重新考虑如何准备样品。从那以后，他一直在育产假至今。