Does ionizing radiation induce metastasis in canine melanoma?

电离辐射会诱导犬黑色素瘤转移吗？

• 批准号: 22K14993
• 负责人: 根本 有希
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K14993/
• 关键词: 放射線; イヌ; 悪性黒色腫; 放射線治療; 犬; 転移

イヌの悪性黒色腫は急速な腫瘍増大と早期に起こる遠隔転移により非常に予後が悪い。放射線治療により腫瘍を制御しても腫瘍の転移が生存率の低下を招く。そこで転移の制御を目指す放射線治療が必要とされる。しかし腫瘍への放射線照射が肺転移を亢進するか抑制するかは不明である。そこで本研究では放射線照射がイヌ悪性黒色腫の転移能にどのように影響を与えるかという問いを解決するため細胞株にX線照射を行い、その細胞の運動能や転移関連因子の変化を検討することとした。初年度は4つのイヌ悪性黒色腫細胞株を用いた実験を行った。まず最初にイヌの悪性黒色腫の細胞株を用いた放射線感受性を調べた。放射線感受性にはトリパンブルーを用いた色素排出試験と、コロニー形成試験を行った。色素排出試験では、2, 8, 10 Gyを照射し、照射線量が増加すると有意に生細胞数は減少したが、高線量であっても照射後1, 3, 5日後で細胞の増殖は認められた。コロニー形成法では、コロニーを形成した3つの細胞株について検討を行った。全ての細胞で0, 2, 4, 6, 8 Gy照射時において有意にコロニー数は減少し、そのうち1つの細胞株で他の2つの細胞株よりも放射線抵抗性を示すものがあった。次に細胞の照射後の運動能を検討するためにInvasion assayとWound healing assayを行った。Invasion assayでは複数回の実験において結果が安定せず、現在も細胞数を含め、条件を検討中である。Wound healing assayでは照射後12, 24, 36, 48時間後においてどの細胞株においても有意な運動能を認めたが、それらは照射線量の違いにおいて有意な変化が見られず異なる照射線量において運動能の違いは認められなかった。

由于肿瘤的快速生长和早期远处转移，狗的恶性黑色素瘤的预后较差。即使肿瘤受放射治疗控制，肿瘤转移也会导致存活率降低。因此，需要旨在控制转移的辐射疗法。但是，目前尚不清楚肿瘤的辐射是否会增强或抑制肺转移。因此，在这项研究中，我们决定解决辐射如何通过X射线辐射在细胞系上影响犬类黑色素瘤的转移潜力的问题，并检查细胞运动和转移相关因素的变化。第一年是使用四种犬类恶性黑色素瘤细胞系实验。首先，我们使用狗中恶性黑色素瘤的细胞系研究了辐射敏感性。为了进行辐射灵敏度，使用锥虫蓝色和菌落形成测试进行了染料疏散测试。在染料排泄试验中，当用2、8和10 Gy辐照时，辐照剂量增加时，活细胞的数量显着减少，但即使在高剂量下，也观察到细胞增殖后1、3和5天后，在辐照后1、3和5天。在菌落形成中，检查了形成菌落的三个细胞系。所有细胞在0、2、4、6、8 Gy辐射时均显示出显着降低的落菌量，其中一个细胞系显示出比其他两个细胞系更大的辐射抗性。接下来，进行了浸润测定法和伤口愈合测定法，以检查照射后细胞的运动性。在对入侵测定法的多个实验中，结果不稳定，包括细胞计数在内的条件仍在研究中。在伤口愈合测定中，在辐照后的12、24、36和48小时，在所有细胞系中都观察到明显的运动，但是在辐射剂量的差异中未观察到明显的变化，并且在不同剂量下未观察到运动差异。