芳香族炭化水素受容体活性検出法を用いた繊維製品中有害物質スクリーニング法の確立

芳香烃受体活性检测法建立纺织产品中有害物质筛查方法

• 批准号: 21K17281
• 负责人: 西 以和貴
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kanagawa Prefectural Institute of Public Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K17281/
• 关键词: 芳香族炭化水素受容体; 繊維製品; 有害物質; スクリーニング; AhR; LC/TOF-MS; 安全性評価; 核内受容体

市販繊維製品には化学物質を用いて様々な加工がなされている。法律上、製造又は輸入業者は繊維製品に使用された化学物質の健康影響を把握し健康被害を生じさせないよう求められているが、実製品の安全性把握は不純物・分解物等の影響もあり、困難な点も多い。そこで、本研究では市販繊維製品中有害物質をスクリーニングすることを目的に、製品の抽出物のAhR活性を調べるとともに活性物質の同定を試みる。令和4年度は前年度にAhR活性が検出された市販繊維製品のうち、1製品に含まれるAhR活性寄与物質の同定を試みた。液液分配、シリカゲル分画、HPLC分取により分画を行い、活性が認められた画分をOrbitrap-LC/MSで分析し、含有物質の精密質量を得た。その結果、AhR活性を有する化合物を一つ同定することができた。また、併行して、昨年度確立した7-ethoxyresorufin-O-deethylase(EROD)法よりも高感度にAhR活性を検出できるルシフェラーゼアッセイ法も検討した。その結果、AhR応答性のルシフェラーゼ遺伝子を安定的に発現する細胞の樹立に成功した。

使用化学品以多种方式处理市售的纺织品。在法律上，制造商或进口商必须了解纺织品中使用的化学物质的健康影响，而不会造成健康损害，但是由于杂质，分解产品的影响，分解产品等的影响，了解实际产品的安全通常很困难。因此，在本研究中，我们将研究产品提取物的AHR活性，并试图鉴定出具有筛查的活性物质，以筛选有害物质，以获取有害物质的质地质地。在2022年，我们试图识别AHR活性归因于上一年中AHR活性的商业纺织品中包含的物质。通过液 - 液分配，二氧化硅凝胶分级和HPLC制备进行分馏，并通过Orbitrap-LC/MS分析活性分数以获得所含物质的精确质量。结果，确定了一种具有AHR活性的化合物。此外，我们还研究了一种荧光素酶测定法，该测定法可以比去年建立的7-乙氧基resorufin-O-二乙基酶（EROD）方法更敏感地检测AHR活性。结果，成功地建立了稳定表达AHR响应性荧光素酶基因的细胞。

项目成果

市販繊維製品からのAryl hydrocarbon receptor活性の検出

商业纺织品中芳基烃受体活性的检测

• 发表时间: 2023
• 作者: 西以和貴;吉冨太一;河上強志
• 通讯作者: 河上強志