芳香族炭化水素受容体活性検出法を用いた繊維製品中有害物質スクリーニング法の確立

芳香烃受体活性检测法建立纺织产品中有害物质筛查方法

• 批准号: 21K17281
• 负责人: 西 以和貴
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kanagawa Prefectural Institute of Public Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K17281/
• 关键词: 芳香族炭化水素受容体; 繊維製品; 有害物質; スクリーニング; AhR; LC/TOF-MS; 安全性評価; 核内受容体

市販繊維製品には化学物質を用いて様々な加工がなされている。法律上、製造又は輸入業者は繊維製品に使用された化学物質の健康影響を把握し健康被害を生じさせないよう求められているが、実製品の安全性把握は不純物・分解物等の影響もあり、困難な点も多い。そこで、本研究では市販繊維製品中有害物質をスクリーニングすることを目的に、製品の抽出物のAhR活性を調べるとともに活性物質の同定を試みる。令和4年度は前年度にAhR活性が検出された市販繊維製品のうち、1製品に含まれるAhR活性寄与物質の同定を試みた。液液分配、シリカゲル分画、HPLC分取により分画を行い、活性が認められた画分をOrbitrap-LC/MSで分析し、含有物質の精密質量を得た。その結果、AhR活性を有する化合物を一つ同定することができた。また、併行して、昨年度確立した7-ethoxyresorufin-O-deethylase(EROD)法よりも高感度にAhR活性を検出できるルシフェラーゼアッセイ法も検討した。その結果、AhR応答性のルシフェラーゼ遺伝子を安定的に発現する細胞の樹立に成功した。

市售纺织产品使用化学物质以各种方式加工。根据法律规定，制造商和进口商必须了解纺织品中使用的化学物质对健康的影响并防止健康危害，但由于杂质、分解产物等的影响，很难了解实际产品的安全性，有很多困难。因此，在本研究中，为了筛查市售纺织产品中的有害物质，我们将检查产品提取物的AhR活性并尝试鉴定活性物质。在 2020 财年，我们试图识别一种市售纺织品中所含的有助于 AhR 活性的物质，该纺织品在前一年检测到了 AhR 活性。通过液液分配、硅胶分级、HPLC分级进行分级，通过Orbitrap-LC/MS对观察到活性的级分进行分析，求出所含物质的准确质量。结果，我们能够鉴定出一种具有 AhR 活性的化合物。与此同时，我们还研究了一种荧光素酶测定方法，该方法可以比去年建立的7-乙氧基试卤灵-O-脱乙基酶（EROD）方法更高的灵敏度检测AhR活性。结果，他们成功建立了稳定表达 AhR 响应荧光素酶基因的细胞。

项目成果

市販繊維製品からのAryl hydrocarbon receptor活性の検出

商业纺织品中芳基烃受体活性的检测

• 发表时间: 2023
• 作者: 西以和貴;吉冨太一;河上強志
• 通讯作者: 河上強志