乳歯歯髄由来間葉系幹細胞エクソソームを応用した低侵襲性顎裂部閉鎖治療の確立

利用乳牙髓源间充质干细胞外泌体建立微创颌裂闭合治疗方法

基本信息

批准号：
21K17186
负责人：
阿部崇晴
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K17186/
关键词：
エクソソーム培養上清 SHED DPSC HCEM 骨再生 miRNA SHED-CM

项目摘要

乳歯より単離培養した間葉系幹細胞(MSC)の培養上清から抽出したエクソソームをSHED-Exo、永久歯より単離したMSCの培養上清から単離したエクソソームをDPSC-Exoとし、実験に用いた。原子間力顕微鏡での観察により粒子径は50-100 nmであった。骨髄由来間葉系幹細胞(BMSC)にSHED-ExoおよびDPSC-Exoを添加すると、エクソソームを添加することにより、有意に細胞数の増加が認められた。また、骨分化誘導したBMSCにSHED-ExoおよびDPSC-Exoを添加し、アリザリンレッド染色により定量評価を行った。エクソソームの添加により、有意な骨分化が認められた。また、培養したBMSCにSHED-ExoおよびDPSC-Exoを添加したところ、エクソソームの添加により、有意なALPの遺伝子発現の増加が認められた。また、エクソソームに内包されるmiRNAについて調査したところ、miR1474AやmiR326といった制御遺伝子のほか、mir448やmiR451といった血管平滑筋細胞の遊走制御を行うmiRNAが検出された。また現在、SHED-ExoとDPSC-Exoがヒトセメント芽細胞(HCEM)へ及ぼす影響についても調査を進めているところである。上記研究内容について、第61回広島県歯科医学会・第106回広島大学歯学会例会にてポスター発表を行った。

从原发性牙齿分离的间充质干细胞（MSC）的培养上清液中提取的外泌体用作脱落-EXO，从永久性牙齿分离的MSC的培养上清液中分离出的外泌体被用作DPSC-EXO，并用作DPSC-EXO。用原子力显微镜观察表明，粒径为50-100 nm。当将Shed-Exo和DPSC-Exo添加到骨髓来源的间充质干细胞（BMSC）中时，外泌体的添加显着增加了细胞的数量。此外，将SHED-EXO和DPSC-EXO添加到诱导骨分化的BMSC中，并通过艾丽莎林红色染色进行定量评估。外泌体的添加显示出明显的骨分化。此外，当将SHED-EXO和DPSC-EXO添加到培养的BMSC中时，外泌体的添加显示出ALP基因表达的显着增加。此外，当我们研究外泌体中包含的miRNA时，我们检测到调节基因，例如miR1474a和miR326，以及调节血管平滑肌细胞（如miR448和miR451）的miRNA。我们目前还正在研究Shed-Exo和DPSC-Exo对人胶质细胞（HCEM）的影响。上述研究内容在第61次广岛县牙科学会和第106届广岛大学牙科协会常规会议上介绍。