歯周病菌P. gulaeによるバイオフィルム形成機序の解明と関連病原因子の同定

牙周病原菌古拉菌生物膜形成机制的阐明及相关致病因子的鉴定

基本信息

批准号：
21K17182
负责人：
吉田翔
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

バイオフィルムは細菌および細菌が産生する菌体外多糖類が固相表面に形成した集合体を示す。バイオフィルム内の病原性細菌が関与する感染症をバイオフィルム感染症と称され、歯周病はバイオフィルムによる感染症の１つとされている。Porphyromonas gulae は様々な動物の歯周炎の発症、進行において大きく関わる病原性細菌である。近年ではヒトへ感染することが明らかとなっていることから、本菌はヒト歯周病の原因菌の１つである可能性が示唆されている。しかしながら P. gulae のバイオフィルム形成機序はまだ明らかにされていない。本研究課題では、P. gulae バイオフィルム形成における病原因子の役割を解明し、その形成機序の一端を明らかにすることを目的とする。昨年度は、P. gulaeのバイオフィルム形成は線毛遺伝子依存性であることを明らかにした。線毛の影響を確認するため、バイオフィルム形成能の高いC型線毛保有株の fimA 遺伝子欠損株ならびに同相補株を作製した。本年度は、fimA 遺伝子欠損株と同相補株の性状を遺伝子ならびにタンパクレベルで明らかにすると共に、菌増殖や黒色色素産生能、プロテアーゼ活性に差が無いこと確認した。これらの変異株を使用し、バイオフィルム形成量を確認したところ、野生株と明確な差は認められなかった。また P. gulae プロテアーゼ領域の塩基配列の探索も行った。

生物膜是由细菌和细菌产生的胞外多糖在固体表面上形成的聚集体。涉及生物膜内致病菌的感染性疾病称为生物膜感染，牙周病被认为是生物膜引起的感染性疾病之一。古拉卟啉单胞菌是一种致病菌，与多种动物牙周炎的发生和进展密切相关。近年来，人们已经清楚这种细菌可以感染人类，这表明这种细菌可能是人类牙周病的致病菌之一。然而，古氏假单胞菌生物膜形成机制尚未阐明。本研究项目的目的是阐明致病因子在古莱菌生物膜形成中的作用，并阐明部分形成机制。去年，我们发现古氏假单胞菌生物膜的形成依赖于菌毛基因。为了证实菌毛的作用，我们创建了一个 fimA 基因缺陷菌株和一个具有高生物膜形成能力的 C 型菌毛同源互补菌株。今年，我们在基因和蛋白质水平上阐明了fimA基因缺陷菌株和同源互补菌株的特征，并证实它们在细菌生长、黑色素生产能力或蛋白酶活性方面没有差异。当使用这些突变株确认生物膜形成量时，没有观察到与野生型的明显差异。我们还搜索了 P. gulae 蛋白酶区域的碱基序列。