骨再生効果を増強した組み替え成長因子による低侵襲性骨再生方法の開発

开发利用重组生长因子增强骨再生效果的微创骨再生方法

基本信息

批准号：
21K17166
负责人：
菊池恵美子
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Iwate Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K17166/
关键词：
間葉系幹細胞 TGF-β CTGF 唇顎口蓋裂成長因子骨再生 TGFβ

项目摘要

唇顎口蓋裂は胎生期における骨や粘膜の形成不全により生じる先天性疾患である。口蓋形成にはTGF-βやCTGFが重要な役割を担っていることが報告されている。TGF-βは細胞増殖、分化、遊走、浸潤、細胞外マトリックスの再構築など多くの役割を担っている成長因子であり、骨芽細胞の分化や増殖も制御している。一方、CTGFは血管新生、軟骨形成、腫瘍形成のほか骨形成にも関与している。CTGFノックアウトマウスは二次口蓋形成が不全となることから、CTGFは口蓋形成において重要な因子であると報告された。特に口蓋粘膜の形成にはTGF-βとCTGFの両者の関与が報告されているが、口蓋骨の形成や融合における両者の相互作用については明らかとなっていない。本年度はTGF-βとCTGFの相互作用が間葉系幹細胞(MSC)の骨芽細胞分化においてどのような影響を与えるのかを検証した。最初にTGF-βとCTGFの相互作用が 1骨芽細胞分化に与える影響を調査し、2細胞内シグナル伝達経路を同定することを目的とする。ヒト骨髄由来MSC株(UE7T-13細胞)をTGF-β、CTGFで単独または共処理し、RT-qPCR法にて骨芽細胞分化マーカー遺伝子のmRNA発現を調査した。Type I collagen、osteopontin、bone sialoproteinでTGF-βとCTGFの共処理によるmRNA発現の上昇が認められた。また、UE7T-13細胞をTGF-βとCTGFで共処理しシグナル経路に特異的な抗リン酸化抗体を用いたウェスタンブロットで検証した結果、p38 MAPKでリン酸化の増強が認められた。以上の結果より、唇顎口蓋裂の患部へ両因子を作用させることで骨や粘膜形成を助長する可能性が示唆された。

lipa胶和口感种族是胎儿骨骼和粘膜引起的先天性疾病。据报道，TGF-β和CTGF在形成中起着重要作用。 TGF-β是发挥很多作用的生长因子，例如细胞增殖，分化，迁移，侵袭和重建细胞外基质，并控制成骨细胞细胞的分化和生长。另一方面，CTGF参与骨形成以及新的血管，软骨形成和肿瘤形成。据报道，随着次级CLEID形成受损，CTGF敲除小鼠是正形成的重要因素。特别是，已经报道了TGF-β和CTGF的涉及到味觉粘膜的形成，但尚不清楚手机形成和融合的相互作用。今年，我们验证了TGF-β与CTGF之间的相互作用如何影响莫利酸干细胞的整骨分化（MSC）。目的是首先研究TGF-β和CTGF之间相互作用对一个成骨细胞的影响，并确定两细胞信号传递途径。人骨骨髓衍生的MSC份额（UE7T-13细胞）仅通过TGF-β和CTGF处理，研究了RT-QPCR方法的mRNA表达，骨BUN细胞分化标记基因的mRNA表达。 I型胶原蛋白，骨桥蛋白和唾液蛋白通过在TGF-β和CTGF之间进行协调，显示出mRNA表达的增加。此外，通过TGF-β和CTGF协调UE7T-13细胞，并使用抗氧化抗体抗体在信号路径上使用蛋白质印迹进行验证，并允许p38 MAPK增加磷酸化。从以上结果表明，这两种因素对唇裂和pa的影响区域的影响可能促进骨骼和粘膜形成。