口腔癌の腫瘍ニッチ形成時に発現するPD-L2の新規悪性化獲得因子としての機能探索

PD-L2（在口腔癌肿瘤微环境形成过程中表达）作为一种新型恶性获得因子的功能探索

基本信息

批准号：
21K17103
负责人：
首藤俊一
金额：
$ 3万
依托单位：
Fukuoka Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K17103/
关键词：
口腔扁平上癌細胞 PD-L 活性酸素種 STAT 口腔扁平上皮癌浸潤転移腫瘍免疫学

项目摘要

【目的】癌組織に発現する免疫チェックポイント分子PD-Lは、細胞障害性T細胞のPD-1受容体に結合し免疫回避により自身が生存するために働くことが知られている。最近、転移や再発した進行性がんは特異的にPD-L発現が上昇することが報告された。しかしながら、２種類存在するPD-L2とPD-L1との発現とその機能の相違に関して、がん種、発現時期及びその役割等未だ不明瞭な点が多くある。本研究課題は、「口腔扁平上皮癌のPD-L2発現が腫瘍の生存や転移の悪性度を規定する」という課題を解明することを目標に行った。【方法】本年度は、ヌードマウスへの口腔扁平上皮癌細胞の移植実験を行う最初の段階として、口腔扁平上皮癌細胞株HSC2細胞を用いて、PD-L1及びPD-L2のノックアウト細胞をゲノム編集法により作製した。また、これらの上皮癌細胞のPD-Lの発現が活性酸素種(ROS)である過酸化水素刺激により影響があるか検討した。【結果】CRISPR-Cas9法を使用したゲノム編集によりPD-L1及びPD-L2ノックアウトHSC-2細胞は作製出来たが、ダブルノックアウト細胞及び２種類のPD-L過剰発現HSC-2細胞の確立まで出来なかった。また、野生型HSC-2細胞にROS刺激を与えると刺激時間依存性にPD-L1及びPD-L2の発現上昇が認められた。さらに、この発現はROS刺激によるSTATシグナル伝達系の活性化を介して調節されていることが明らかになった。

[目的]已知癌组织中表达的免疫检查点分子PD-L与细胞毒性T细胞的PD-1受体结合，通过免疫逃避来维持自身的生存。最近有报道称，PD-L表达在已转移或复发的晚期癌症中特异性增加。然而，关于PD-L2和PD-L1两种类型的表达和功能的差异，仍然有很多不清楚的地方，例如癌症类型、表达时间及其作用。该研究项目的目标是阐明“口腔鳞状细胞癌中的PD-L2表达决定肿瘤的存活和转移的恶性程度”的问题。 [方法]今年，作为口腔鳞癌细胞裸鼠移植实验的第一阶段，我们将利用口腔鳞癌细胞系HSC2细胞生成基因组编辑的PD-L1和PD-L2敲除细胞。它是通过该方法生产的。我们还检查了这些上皮癌细胞中 PD-L 的表达是否受到过氧化氢（一种活性氧 (ROS)）刺激的影响。 [结果]虽然我们能够利用CRISPR-Cas9方法通过基因组编辑产生PD-L1和PD-L2敲除HSC-2细胞，但我们尚未建立双敲除细胞和两种类型的PD-L过表达HSC-2细胞我做不到。此外，当野生型HSC-2细胞受到ROS刺激时，观察到PD-L1和PD-L2的表达以刺激时间依赖性方式增加。此外，研究表明这种表达是通过 ROS 刺激激活 STAT 信号系统来调节的。