上皮バリア低下による眼表面炎症の増悪メカニズムの解明

阐明上皮屏障下降导致眼表炎症加重的机制

• 批准号: 21K16896
• 负责人: 岸本 達真
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kochi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16896/
• 关键词: アレルギー性結膜炎; MUC16; LPS角膜炎; ドライアイ; アレルギー性結膜疾患

本年度は、アレルギー性結膜炎モデルの作製とアレルギーの臨床所見の検討を行った。昨年度の検討で野生型マウス、MUC16欠損マウスのいずれにおいても眼窩外涙腺を摘出しドライアイを誘導することで角膜上皮障害が増悪することが分かったが、野生型マウス、MUC16欠損マウスの間で差はなかったことから、本年度からはMUC16がアレルギーに与える影響を評価するためドライアイを誘導せずに検討を行うこととした。まず、アレルギー性結膜炎モデル確立のため、野生型マウス、MUC16欠損マウスに初回免疫として左足底部および尾根部に抗原として卵白アルブミン（OVA）もしくはブタクサ花粉（RW）を水酸化アルミニウムゲルに懸濁して投与した。初回免疫を行った日をDay0とし、Day7、14にOVAもしくはRWを腹腔内投与し追加免疫を行った。Day20に抗原点眼を行い、引っ掻き回数の計測とアレルギーの臨床所見として眼瞼腫脹、結膜浮腫、結膜充血を0-3のスコアの合計でグレーディングした。その結果、引っ掻き回数、臨床所見ともにRWによる免疫を行った群で野生型と比較しMUC16欠損マウスで有意に増加したことから、RWを用いて検討を行うこととした。Day20からRW抗原点眼を毎日行い、Day28に眼球摘出し、結膜好酸球浸潤数を計測したところ、野生型と比較し、MUC16欠損マウスで優位に好酸球浸潤数は低下した。

今年，我们创建了过敏性结膜炎模型并检查了过敏的临床表现。去年的研究表明，去除眼眶外泪腺并诱导干眼会加重野生型和MUC16缺陷小鼠的角膜上皮损伤；由于没有差异，因此从今年开始我们决定进行一项不诱导干眼的研究，以便评估MUC16对过敏的影响。首先，为了建立过敏性结膜炎模型，我们将卵清蛋白（OVA）或豚草花粉（RW）作为悬浮在氢氧化铝凝胶中的抗原施用到左脚的足底和脊，作为对野生型和MUC16-的初始免疫。有缺陷的老鼠做到了。将首次免疫日指定为第0天，并在第7天和第14天腹腔内施用OVA或RW以进行加强免疫。第20天使用抗原滴眼液，测量划痕次数，并使用0至3的总分对眼睑肿胀、结膜水肿、结膜充血等过敏临床表现进行分级。结果，与野生型相比，用RW免疫的MUC16缺陷小鼠组中的划痕数量和临床表现均显着增加，因此我们决定使用RW进行研究。从第20天开始每天使用RW抗原滴眼液，并在第28天将眼睛摘除并测量结膜嗜酸性粒细胞浸润的数量。MUC16缺陷型小鼠的嗜酸性粒细胞浸润数量显着低于野生型。

项目成果

Promotion of conjunctival fibroblast-mediated collagen gel contraction by mast cells through up-regulation of matrix metalloproteinase release and activation

肥大细胞通过上调基质金属蛋白酶的释放和激活促进结膜成纤维细胞介导的胶原凝胶收缩

• DOI: 10.1016/j.exer.2022.108980
• 发表时间: 2022
• 期刊: Experimental Eye Research
• 影响因子: 3.4
• 作者: Kishimoto Tatsuma;Ishida Waka;Nakajima Isana;Taguchi Osamu;Sugioka Koji;Kusaka Shunji;Fukuda Ken
• 通讯作者: Fukuda Ken